1.3 实验仪器 Ti-S型研究级倒置显微镜(日本Nikon公司)；Thermo 8000型CO2培养箱(美国Thermo Fisher公司)；ABI ViiA7型PCR仪(美国ABI公司)；Gel Doc XR+凝胶成像系统(美国Bio Rad公司)；电泳仪、转膜仪(美国Bio Rad公司)；MR4100型酶联免疫分析仪(美国Dynatech公司)等。

    2 方 法

    2.1 含药血清的制备 选用30只雌性Wistar大鼠，适应性喂养1周后，按体质量递增顺序编号，参照随机数字表将其分为空白组、温阳化浊通络方组，每组15只。温阳化浊通络方组以预试验确定的10倍成人剂量温阳化浊通络方煎剂灌胃，空白组以等量生理盐水灌胃。10 d后，分别于末次灌药后30 min，运用心脏穿刺法采血，分离血清，然后采用断头法处死大鼠。采用HPLC-MS法测定药物主要成分含量，制备含药血清和空白血清。无菌分离血清，56 ℃灭活30 min后，-80 ℃冰箱保存，备用。

    2.2 皮肤成纤维细胞培养及鉴定 在局麻及无菌条件下 ......