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编号:12767627
唑来膦酸对钛微粒诱导的破骨细胞前体细胞RAW 264.7分化的影响(3)
http://www.100md.com 2016年3月1日 风湿病与关节炎2016年第3期
     2.7 Western Blot法检测细胞中RANK、MMP-9、NFATcl蛋白的表达 提取总蛋白,用BCA法测定蛋白浓度,以每泳道上样30 μg蛋白,质量分数为12%的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,采用半干转法将蛋白转印至PVDF膜。在室温下封闭30 min,加入一抗封1 h。每次40 mL洗液漂洗膜6次,即:1 min 2次,20 min 2次,5 min 2次。然后将二抗室温封闭30 min,洗膜5次。AP化学发光底物与膜在室温下孵育反应5 min,压片曝光、显影。采用Phoretix 1D生物电泳图像分析系统分析胶片中蛋白的条带,计算机自动读取并记录每条带的光密度值。

    2.8 统计学方法 采用SPSS 18.0软件进行统计分析。计量资料以表示,首先比较样本是否呈正态分布,并检验方差齐性,多组之间比较先采用F检验,而后进行q检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

    3 结 果

    3.1 ZOL干预后RAW 264.7细胞形态 显微镜下观察发现,与钛微粒共培养后部分RAW 264.7细胞核增多 ......
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