跳骨片水提物对体外大鼠关节软骨细胞活性的影响(3)

http://www.100md.com 2017年1月1日 《风湿病与关节炎》2017年第1期

     20味中药制成的糖衣片，其中骨碎补、狗脊补肝肾、强筋骨[9-12]；马钱子(制)、独活、冰片、羌活、乌药消肿定痛[13]；黄芪能够促使血管重生，改善局部循环[14]；三七、红花、土鳖虫舒筋活血、祛风散寒。诸药配伍合用，共奏补肝肾强筋骨、活血舒筋、祛风散寒、消肿定痛的功效。

    关节软骨由软骨细胞及软骨基质组成，软骨细胞包埋于胶原与蛋白多糖等所形成的致密基质中。Ⅱ型胶原酶消化法是软骨细胞分离及体外培养的一种常用方法，但是其消化时间较长，对细胞有一定损伤[15]。本实验采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法，将关节软骨切成1 mm3的小块，加入5 mL质量分数为0.2%Ⅱ型胶原酶消化获取软骨细胞。与胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶序贯消化法、单纯Ⅱ型胶原酶消化法相比，此法操作相对简单，所需时间较短，污染几率较小，同时可以获得数量较多的软骨[16]。倒置相差显微镜观察不同时期软骨细胞的形态结构，实验结果表明，随着原代培养及传代可以获得较高纯度的软骨细胞 ......