膝关节炎治疗仪对SNP诱导体外大鼠软骨细胞凋亡的影响(2)

http://www.100md.com 2017年6月1日 《风湿病与关节炎》2017年第6期

     2.2 倒置显微镜观察软骨细胞形态 取生长良好的第2代软骨细胞调整为细胞密度1×105·mL-1后，接种于6孔板中，每孔2 mL，放置于细胞培养箱中。48 h后，将细胞随机分为空白对照组、模型对照组[1 mM硝普钠(SNP)诱导24 h]、干预组1(1 mM SNP + KATA 2级强度干预30 min，每日3次)、干预组2(1 mM SNP + KATA 4级强度干预30 min，每日3次)、干预组3(1 mM SNP + KATA 6级强度干预30 min，每日3次)、干预组4(1 mM SNP + KATA 8级强度干预30 min，每日3次)。其中造模方法参照文献[9]，用SNP诱导软骨细胞24 h，具体干预操作同前期实验干预方法[10]：将预置铂丝的六孔板盖子换到含有细胞的六孔板上，再连接KATA进行干预。实验结束后，于倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态。

    2.3 MTT检测软骨细胞活性 按照2.2项中的分组及处理方法干预软骨细胞，24 h后，弃去培养液，用PBS洗涤1次，在6孔板中每孔加入l mL质量分数为0.5% MTT溶液 ......