2.4 Western blot法检测软骨细胞中PGS1、MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白表达水平 各组弃去培养液，PBS洗3次，加入200 μL蛋白裂解液(RAPI∶PMSF = 100∶1)，置于4 ℃冰箱30 min后用细胞刮刀刮去裂解物，收集至EP管中。采用BCA法测定各组蛋白浓度，加入蛋白上样缓冲液，加热变性。根据定量结果，每孔上样20 μg，以质量分数为12%的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，转移至PVDF膜上，TBST洗涤;加入封闭液室温孵育2 h，TBST洗涤;再分别加入PGS1、MMP-13、MMP-9、MMP-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5、β-actin抗体，4 ℃孵育过夜;TBST洗膜3次，加入二抗，室温孵育1 h，TBST洗膜3次;加入ECL显影液曝光、显影。应用Image Lab图像处理软件对显影后的蛋白条带灰度值进行分析。

    2.5 统计学方法 采用SPSS 20.0软件进行统计分析 ......