梅花入骨丹通过Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路调节大鼠退变软骨细胞外基质代谢紊乱的作用机制(3)
2.7 统计学方法 采用SPSS 22.0软件进行统计分析。计量资料以表示,对所测定结果进行正态性及方差齐性检验,组间比较采用t检验,不满足方差分析时采用非参数检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。3 结 果
3.1 大鼠膝关节软骨细胞的原代培养、传代培养和鉴定 经Ⅱ型胶原酶机械消化获得SD大鼠软骨细胞,见图1(1);原代软骨细胞培养7 d后,细胞长至90%,软骨细胞逐渐融合成单层,周围可见具有折光性细胞外基质,呈典型“铺路石”状,见图1(2);原代细胞长满经传代培养后,软骨细胞中的杂质细胞比例逐渐减少,其中以第2代软骨细胞状态最佳,形态规则,胞核清晰,胞浆丰富,增殖速度快,纯化彻底,见图1(3)。Ⅱ型胶原染色鉴定结果显示,阳性对照组软骨细胞核清晰,呈蓝色,胞浆区被染为棕黄色,见图2(1),阴性对照组胞浆区不着色,见图2(2);经甲苯胺蓝染色后,可见细胞核呈紫红色,见图2(3)。由此,可鉴定本实验所选用细胞符合典型的软骨细胞生物学特性。
3.2 药物作用的最佳浓度和作用时间 经不同浓度、不同时间干预后,细胞活力有较明显改变,在浓度上,0~100 μg·mL-1 BCAE均能促进细胞增殖,但100 μg·mL-1浓度细胞活力达最高值 ......
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