韩敏敏 ，高程海，米顺利，陈显强，薛命雄，梁振秀，唐振洲 ，张 玲，*

    (1.广西中医药大学中医药科学实验中心，广西 南宁 530200；2.广西中医药大学海洋药物研究院，广西 南宁 530200；3.广西北海生巴达生物科技有限公司，广西 北海 536000)

    钝顶螺旋藻(spirulina platensis)是一种多细胞丝状螺旋形海洋藻类生物，富含藻蓝蛋白(C-phycocyanin，C-PC)、多糖、β-胡萝卜素等生物活性成分。其中，藻蓝蛋白是螺旋藻中一种主要功能性蛋白质，占螺旋藻(干基)的20%[1]，是一种在光激发下能产生活性氧从而进行光动力治疗的光敏剂[2]，具有提高机体免疫力、抗肿瘤、抗氧化、清除自由基、抗炎、保护肝脏等药理活性，有极大开发成药物的潜力[3-5]。

    光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)是治疗肿瘤的有效手段之一，PDT 治疗可导致肿瘤细胞死亡和凋亡，并损伤肿瘤相关血管。近年来，PDT 的作用机制越来越受到关注。肿瘤细胞的免疫逃逸是肿瘤发生发展的重要因素[6-7]。目前，已有多项相关研究证实藻蓝蛋白联合光动力疗法治疗实体瘤取得了不错的治疗效果[8-10]。本研究从机体免疫调节功能的角度探讨藻蓝蛋白联合光动力疗法对人胰腺癌细胞的体内抗肿瘤作用，为开发研制抗肿瘤药物以及将藻蓝蛋白作为光敏剂开发应用于临床癌症疾病治疗提供一定的实验依据。

    1 实验材料

    1.1 动物 SPF级BALBC/C裸鼠，40只，雌雄各半，体质量18～20 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK(湘)2019-0004；质量合格证号：430727201101851386。无菌环境饲养。

    1.2 细胞株 人胰腺癌细胞SW1990 购于中国科学院昆明动物研究所。

    1.3 试药与试剂 钝顶螺旋藻藻蓝蛋白冻干粉，纯度为A620/A280≥3.5，购自宁波宾美生物科技公司，密封阴凉干燥避光处保存，使用前用灭菌蒸馏水配制成所需浓度；注射用环磷酰胺(cyclophosphamide for Injection，CY，江苏盛迪医药有限公司产品)购于广西中医药大学附属瑞康医院，每瓶0.2 g，储藏温度不超过25 ℃，使用前用灭菌生理盐水配制成所需浓度；不完全Leibovitz’s L-15 培养基(货号：KGM41300N，江苏凯基生物技术股份有限公司)；0.25 % Trypsin-EDTA(1×)(货号：2120734，Gibco 公司)；青链霉素混合液(货号：2257222 ......