(牡丹江医学院,黑龙江牡丹江157011)

    白毛藤(Solamum lyratum Thunb),又名白英、毛凤藤等,系茄科植物白英的全草,全草及根入药,具有祛风湿、解毒消肿、抗癌的作用[1]。国内外研究表明,其对多种体外肿瘤细胞具有抑制作用[3-4],但对其有效成分及其抗肿瘤机制,尤其是分子水平机制研究尚未见进一步报道。本研究拟观察白毛藤水提液对BGC-823细胞是否具有增殖抑制活性及诱导凋亡作用,并初步探讨其分子水平机制,为白毛藤抗癌新药的开发,奠定一定的理论及实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人胃癌细胞BGC-823细胞株(武汉中美科技有限公司),RPMI-1640培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco公司),Trizol(Sigma公司),引物核苷酸片段(上海生工生物技术有限公司)。

    1.2 实验分组 按白毛藤水提液的浓度分为4组:对照组:含BGC-823细胞的 RPMI-1640培养液;实验组:RPMI-1640培养液倍比稀释的4,8,16mg/mL的白毛藤水提液。

    1.3 MTT比色法测定细胞增殖抑制率 每个药物浓度设12个平行孔,每孔细胞密度为1×105个/mL,分别培养12、24和48 h后,加入MTT培养4 h后,弃去培养基,每孔加入 150 μ L二甲基亚砜,酶标仪测定490 nm各孔的(OD)值。比色时以培养液调零。按公式计算细胞生长抑制率(inhibition rate,IR)。IR=(对照组OD-实验组OD)/(对照组OD-空白组OD)×100% ......