妇科病证结合动物模型的研究
肝郁,造模,1妇科病证结合模型的造模方法,2问题与展望
俞丕超,张建伟(1.山东中医药大学,山东 济南 250355;2.山东中医药大学附属医院 中西医结合生殖与遗传中心,山东 济南 250011)
在妇科领域中,各种疾病发病机制及各种新的治疗方法的研究在很大程度上依赖于动物实验研究。随着妇科疾病的发生、发展,病证结合动物模型成为重要的实验方法和手段。目前妇科病证结合动物模型的研究主要涉及月经病、妇科杂病等,将病和证紧密的结合,更好地模拟临床状态。
1 妇科病证结合模型的造模方法
1.1 复合因素建立妇科病证结合模型 该方法是指在中医药理论的指导下,结合现代医学理论与实验动物科学知识,分别(或同时)采用传统中医学病因复制证候动物模型和现代医学病因复制疾病模型,使模型动物同时具有疾病和证候特征。
1.1.1 肝郁血瘀型宫环出血病证结合大鼠模型 李慧[1]选用体质量(280±300)g SD雌性大白鼠,已育未孕,采用秦大莲等[2]的造模方法略加改进,通过手术将改造后的IUD固定于右侧子宫壁上,手术7 d后,参照高萧枫等[3]的方法结合孤养造成肝郁模型,将大鼠单笼孤养,用细纱条束缚四肢,使其正常生存本能受阻而不能表达,导致肝疏泄不及,形成一种“郁怒”状态,持续时间从第1天的4 h逐渐增至每天6 h,连续28 d。自造模第22天开始予宫环止血Ⅰ号(香附10 g,白芍10 g,三七3 g,炒蒲黄10 g,马鞭草12 g,仙鹤草10 g,女贞子10 g,旱莲草10 g。经80 ℃水浴蒸发浓缩成含生药1.5 g/mL的浓缩药液,置4 ℃冷藏备用)按0.665 g/100(g·d)灌胃,共计7 d。以大鼠的体质量、蔗糖水摄入量以及行为学指标的变化作为观察指标,并应用抗体芯片技术测量动物模型子宫组织细胞因子水平。造模成功后大鼠表现出饮食、活动减少,喜欢贴壁、叫声尖细、胡须下垂、反应迟缓等情志和行为的改变,符合肝郁证动物模型的症状[4-5]。体质量增长缓慢,蔗糖摄入率降低,提示肝郁大鼠模型快感缺乏,对奖赏刺激兴趣缺失,药物治疗后以上症状均得到缓解。子宫组织细胞因子中睫状神经营养因子(CNTF)显着降低,白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)显著升高,而治疗药物可逆转这种表达,甚至使其接近正常水平。
1.1.2 气虚血瘀证卵巢癌大鼠模型 张勤华等[6]选用清洁级Wistar雌性大鼠,体质量100~120 g ......
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