冀娇娇，袁 将，张亚丽，王加利，全庆华，姬瑞芳，刘永刚

    (北京中医药大学中药学院，北京 100102)

    秀丽隐杆线虫模型在中药活性筛选中的方法学考察

    冀娇娇，袁 将，张亚丽，王加利，全庆华，姬瑞芳，刘永刚*

    (北京中医药大学中药学院，北京 100102)

    目的 基于秀丽 隐杆线虫生物模型，建立快速筛选中药活性的方法。方法 选用亨廷顿舞蹈症疾病模型АМ141线虫株作为模型，以骆驼蓬多糖和小檗碱为代表药物，分别在固体及液体培养基中加入中药提取物或 单体小分子 化合物，以中药提取物溶解度、培养基有无污染、线虫polyQ荧光点数目、线虫形态及生长状态作为考察指标。结果 小檗碱20 μМ和骆驼蓬多糖10 mg/mL可显著抑制АМ141线虫的polyQ聚集症状。液体培养基中的线虫易污染，长势不一，且中药提取物溶解性不好影响观察，所以筛选中药提取物时应使用固体培养基。结论 秀丽隐杆线虫模型用于药物筛选，快捷、方便、简单。

    秀丽隐杆线虫；中药；活性筛选

    秀丽隐杆线虫 (caenorhabditis elegans，简称“线虫”)是经典的模式动物，以结构简单、生命周期短、与人类基因保守性较高等独特优势，被广泛用于生命科学领域的研究[1-2]。此外，由于线虫在药物筛选方面独特

    的优势，如无需药物诱导即可造模，能够稳定遗传等优势，使线虫逐渐成为新型的药物筛选平台[3-6]。人口老龄化趋势上升，神经退行性疾病成为影响人类生活的一大障碍[7]。中药在治疗神经退行性疾病方面具有很大的潜力[8]，但由于中药成分复杂等特点，使其在药效研究及机制探讨上困难重重。因此，笔者应用线虫亨廷顿舞蹈症疾病模型АМ141线虫株，建立适用于快速筛选治疗神经退行性疾病活性中药成分的方法学，为线虫作为活性药物筛选模型的建立提供数据支持。

    1 材料

    1.1 材料 骆驼蓬种子由新疆医科大学提供。肉苁蓉购自北京同仁堂；小檗碱购自中国食品药品检定研究院。所用有机试剂均为分析纯，购自北京化工厂。

    1.2 仪器 生化恒温培养箱(天津泰斯特仪器有限公司)；体式显微镜(Nikon公司)；荧光显微镜(Zeiss公司)；激光共聚焦扫描显微镜(Zeiss公司)。

    1.3 动物模型 秀丽隐杆线虫亨廷顿舞蹈症疾病模型АМ141线虫株(rmIs133 [unc-54p::Q40::YFP])购自СGС线虫中心。

    2 方法

    2.1 中药组分提取 称取骆驼蓬种子20 g置于索氏提取器中 ......