疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠CYP2E1基因表达的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
陈 进,冯崇廉,聂钊源,邓 炜,李伟杰(广州医科大学附属第三医院中医科,广州 510150)
疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠CYP2E1基因表达的影响
陈 进,冯崇廉*,聂钊源,邓 炜,李伟杰
(广州医科大学附属第三医院中医科,广州 510150)
目的 探讨疏肝消脂Ⅲ方胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的防治作用及对肝组织细胞色素P4502E1mRNA表达的影响。方法 用高脂乳剂灌胃建立NAFLD大鼠模型,于灌胃第6周末形成脂肪肝后,给予疏肝消脂Ⅲ方胶囊和水飞蓟宾胶囊4周,在光镜下观察各组肝脏病理变化,并通过荧光定量(qPCR)法测定大鼠肝组织CYP2E1的mRNA的表达情况。结果 与模型组相比,各药物组肝脏病理变化改善;疏肝消脂Ⅲ方组CYP2E1的mRNA水平较模型组降低(P <0.05)。结论 疏肝消脂Ⅲ方胶囊能明显改善高脂饮食大鼠脂肪肝病理学变化,抑制NAFLD氧化应激反应,保护肝脏,作用机制可能与CYP2E1表达有关。
疏肝消脂Ⅲ方胶囊;非酒精性脂肪肝; 细胞色素P4502E1
非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种遗传—环境—代谢应激相关性疾病,其发病机制尚未完全明确,其中氧化应激对于NAFLD的发生发展起着关键作用。NAFLD通常与代谢紊乱(如肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病和血脂异常等)密切相关,目前现代医学并没有专门针对脂肪肝的药物,对于NAFLD的治疗仅限治疗相关的代谢综合征及预防致病因素,如适量运动、合理饮食、药物(如胰岛素增敏剂、调脂药、保肝剂)等综合治疗[1-2]。疏肝消脂Ⅲ方胶囊是冯崇廉主任近20年应用中药治疗脂肪肝的临床经验方,原方疏肝消脂汤在临床上治疗脂肪肝疗效显著[3]。疏肝消脂Ⅲ方胶囊由原方疏肝消脂汤及后来的疏肝消脂Ⅰ方、疏肝消脂Ⅱ方不断改进,经现代制药工艺加工而成。周大林等[4]研究表明疏肝消脂胶囊可以显著降低NAFLD大鼠肝组织细胞色素P450-2El(CYP2E1)。本研究通过实时荧光定量PCR(PCR)观察疏肝消脂Ⅲ方胶囊对NAFLD大鼠肝组织的CYP2E1mRNA表达的影响,从抗氧化角度进一步深入揭示疏肝消脂Ⅲ方胶囊治疗NAFLD的部分作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 46只SPF级雄性SD大鼠,体质量180~220 g,由广东省医学实验动物中心提供,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2013-0002。
1.2 试剂与设备 高脂乳剂(主要组成:200 mL猪油、100 g胆固醇、10 g丙硫氧嘧啶、10 g蛋黄粉、20 g胆酸钠、200 m L吐温- 80、200 m L丙二醇、300 g果糖、蒸馏水等)由广东省医学实验动物中心配制;Trizol试剂盒:Invitrogen Life Technologies公司产品;FastStart Universal SYBR Green Master(Rox):Roche公司产品;PCR引物由Invitrogen Biotechnology Co.LTD公司合成;台式高速冷冻离心机Neofuge 15R:Heal Force公司产品;Step One Plus荧光定量PCR仪:ABI公司产品;MUVB-20凝胶分析系统:美国 Ultra-lum 公司产品 ......
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