温利娟，李 娅，薛晓鸥

    ( 北京中医药大学东直门医院，北京 100700)

    紫柏凝胶抑制宫颈癌Siha细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

    温利娟，李 娅，薛晓鸥*

    ( 北京中医药大学东直门医院，北京 100700)

    目的 研究紫柏凝胶对HPV阳性宫颈癌细胞Siha的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法 选取对数生长期Siha细胞，采用不同浓度(15、7.5、3.25 mg/mL)组，不加药物Siha细胞为对照组。MTS检测细胞生长抑制，台盼蓝染色检测细胞 存活率， HOECHST 33342/PI染色法检测凋亡细胞形态学改变。 结果 MTS法检测，各组紫柏凝胶对Siha细胞的生长均有不同程度的抑制作用，3.125 mg/mL剂量组与空白组相比有统计学意义(p<0.05)，IC50为(15±2.1) mg/mL；台盼蓝染色，紫柏凝胶对Siha细胞生长有一定抑制作用，各浓度组细胞生长抑制率均高于对照组(p<0.05)；紫柏凝胶作用Siha细胞后细胞间质变松，细胞质颗粒增多，染色质凝聚，分块，胞质浓缩； HOECHST 33342/PI染色，荧光显微镜下观察到紫柏凝胶引起细胞发生凋亡。结论 紫柏凝胶能抑制宫颈癌Siha细胞的增殖和诱导其凋亡。

    紫柏凝胶；Siha；细胞增殖；细胞凋亡；MTS

    紫柏凝胶主要由紫草、黄柏、莪术、金银花、苦参、 百部、白及等药物组成。全方具有清热祛湿、解毒活血、杀虫止痒、敛疮生肌之功。药物治疗后热得退、湿得除、瘀得化、毒得清，自然带下自止，流血自止，创面收敛愈合，阴痒腹痛等诸症缓解。该方由我院名老中医郭志强教授，运用中医“治病当治未病”的理论精髓创立，该方经过前期部分临床观察，用于治疗宫颈高危型HPV(HR-HPV)感染，疗效甚佳[1-10]，但该方的具体作用机理尚不十分明确，值得运用现代化手段去深入研究。本实验通过MTS、细胞形态观察、台盼蓝染色及Hoechst 33342染色，观察紫柏凝胶对HPV阳性宫颈癌Siha细胞增殖和凋亡诱导作用，为抗 HPV感染进而预防宫颈癌的药物研发提供研究基础。

    1 材料

    1.1 药材与试剂 紫柏凝胶由本实验室萃取(莪术加8倍量水浸泡后水蒸气蒸馏提取，挥发油与冰片用β-环糊精包合，莪术药渣与金银花、白及加8倍量水煎煮2次，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15清膏。紫草、黄柏、苦参、百部、儿茶等5味药加入80%乙醇回流提取2次，提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60～65 ℃)清膏 ......