白 冰，张冬娜，蒋本春，房金波，马艺珍，朱羿龙，朱光泽，李 霄，金宁一

    (长春中医药大学吉林省院士工作站，长春 130117)

    肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，其发病率与死亡率在过去几十年间迅速增长，已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。非小细胞肺癌包括腺癌、大细胞癌，鳞状细胞癌，与小细胞肺癌相比具有癌细胞生长分裂速度慢，扩散转移晚等特点。非小细胞肺癌发生率约占所有类型肺癌的80～85%，约75%的患者发现时已处于中晚期，五年生存率极低[1]。肺癌占所有男性癌症的18%，占全部女性癌症的7%。

    近十年来，世界各国已经应用多种溶瘤腺病毒在Ⅰ期和Ⅱ期临床实验中对数百位患者进行治疗，而且中国已经率先批准了溶瘤腺病毒用于肿瘤治疗，美国和欧洲目前也在进行有关溶瘤腺病毒的Ⅲ期临床试验[2]。Onyx-015是由美国Onyx公司开发的一种能够在肿瘤细胞中特异性复制并裂解肿瘤细胞的腺病毒药物。Onyx-015可与化疗联合运用于肿瘤治疗，具有良好的疗效。研究表明，溶瘤腺病毒对对肺癌[3]、膀胱癌[4]、前列腺癌[5]、乳腺癌[6]、胃癌[7]等多种肿瘤细胞均有显著性抑制作用。本研究所采用的基于肿瘤特异性启动子hTERTp、病毒复制必须基因E1A和凋亡素基因Apoptin通过RAPAd.I腺病毒载体系统构建而成的溶瘤腺病毒ATV是由李霄[8]等构建，具有肿瘤特异性杀伤和肿瘤特异性复制能力的双特异性溶瘤腺病毒。ATV通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤细胞增殖，ATV诱导人宫颈癌细胞及人肺癌细胞凋亡的凋亡率分别可达到(45.315±5.013)%[9]和(73.96±2.31)%[10]。本研究通过CCK-8检测、Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI流式细胞术、胞浆活性氧检测一系列体外实验验证双特异性溶瘤腺病毒可通过调节活性氧水平引起人肺癌细胞凋亡。

    1 材料与方法

    1.1 细胞、病毒与主要试剂 双特异性溶瘤腺病毒(ATV)由本实验室构建并保存，人肺癌细胞A549由本实验室冻存 ......