王清华，姚 旭，魏新智，鞠业涛，闵冬雨

    (辽宁中医药大学附属医院，沈阳 110033)

    钙激活氯通道(CaCCs)很早就已被人们研究，直到2008年才证明跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16A，TMEM16A，也被称为anoctamin1)是钙激活氯通道的分子基础。该通道的特征是：一方面受细胞膜电压调节，表现为电流的外向整流特性；另一方面它与细胞浆的钙离子浓度相关，表现为钙离子浓度依赖性激活。TMEM16A通道受钙离子结合位点变构调节来控制通道的开关。课题组前期研究发现，在AP动物和细胞模型中，TMEM16A蛋白表达上调；TMEM16A高表达促进胰腺炎的发生发展，提示TMEM16A可能成为治疗AP新靶标[1]。

    芍药苷是芍药的主要药效成分，具有广泛的抗炎抗免疫作用[2]。研究[3]发现，芍药苷对AP模型大鼠具有治疗作用。然而芍药苷治疗急性胰腺炎的机制不清。课题组前期研究发现，芍药苷可抑制AP时腺泡细胞内的TMEM16A蛋白，据此本研究以TMEM16A为切入点，研究芍药苷抑制TMEM16A治疗AP的可能作用机制，为芍药苷治疗AP提供理论基础。

    1 材料

    1.1 细胞

    大鼠胰腺腺泡细胞AR42J购于美国ATCC公司。

    1.2 药品与试剂

    芍药苷(北京索莱宝科技有限公司，批号为SP8030)；雨蛙肽(美国Sigma公司，批号为C9026)；大鼠TNF-α和IL-6 ELISA试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号分别为 E-ELR2856c和 E-EL-R0015c)；TMEM16A抗体(美国abcom公司，批号为ab191040)；山羊抗兔二抗(美国abcom公司，批号为ab205718)； Lipofectamine 2000转染试剂(美国Invitrogen公司，批号为11668-019)；CCK8细胞增殖和毒性检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公司，批号为CA1210)；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)(美国Gibco公司，批号为10270-106)、RPMI1640培养基(美国Gibco公司，批号为12633012)；RIPA裂解液(强)(上海碧云天生物技术有限公司，批号为P0013B)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (上海碧云天生物技术有限公司，批号为P0010S)。

    1.3 仪器 ......