千金消澼液对肠黏膜上皮屏障紧密连接蛋白的影响
1材料与方法,1细胞,2药物与试剂,3细胞培养,4CCK-8法细胞活性检测,5实验设计,6Western-bolt法蛋白含量检测,7统计学方法,2结果,1不同浓度药物对Caco-2细胞活力的影响,2千金消澼液对于T
谷佰健,陈碧心,周建华*(1.长春中医药大学,长春 130117;2.吉林省卫生健康信息中心,长春 130061)
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种累及结直肠的慢性非特异性免疫性疾病,是炎性症肠病的一种。主要表现为肠黏膜上皮结构破坏形成溃疡,继而出现黏液脓血便等症状,肠上皮紧密连接(tight junction, TJ)破坏与UC的发病密切相关。千金消澼液(QJXP)是一种能促进黏膜愈合,保护肠黏膜的中药灌肠剂,临床效果良好,在前期研究中发现,QJXP能减少三硝基苯磺酸诱导的结肠组织中嗜中性粒细胞和淋巴细胞,浆细胞的含量[1],但其对肠粘膜保护机制尚不明确。现通过观察QJXP对肠黏膜上皮屏障TJ作用,丰富QJXP治疗UC的理论依据。
1 材料与方法
1.1 细胞
人结肠腺癌细胞Caco-2由吉林省酵母表达蛋白质药物研发重点实验室提供。
1.2 药物与试剂
千金消澼液组成为白及10 g,白蔹10 g,白芷10 g,当归10 g,防风10 g,白矾5 g,白芷、当归、防风三味提取挥发油,剩余药渣与白及、白蔹加水煎煮提取,当药液温度降至60 ℃时加入白矾,加水定容至50 mL,搅拌混匀。原液相当于生药1.1 g·mL-1,将原液加入0.1%羧甲基纤维素钠促溶,充分超声震荡,多次离心后取上清溶液,0.22 μm滤膜过滤,以2%FBS的DMEM培养基稀释至1 g·mL-1母液;柳氮磺吡啶(salazosulfapyridine,SASP)依据上述方法分别配置成20 mmol·L-1母液 ......
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