【摘要】目的 构建Hsp90α基因的单质粒四环素/强力霉素诱导表达系统，并验证其不同表达量对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法 通过PCR，分别从pRetroX-Tet-On Advanced质粒和pcDNA3.1-EGFP质粒中扩增rtTA表达盒和EGFP基因，依次将rtTA和EGFP基因克隆入pTRE-Tight载体中，pRetroX-Tight载体中，获得EGFP标记的Tet-on单质粒系统。基于本系统，构建DOX诱导的Hsp90α表达质粒pRetroX-Hsp90α-EGFP-Tet-On，然后采用脂质体转染HepG2细胞，以不同浓度(0，100，500，2500 ng/mL)的DOX诱导，通过荧光显微镜、荧光定量PCR以及Western blot检测EGFP和目的蛋白Hsp90α的表达。结果 转染质粒载体后的HepG2细胞经不同浓度的DOX 24 h后，RT-PCR和Western blot结果显示一致，随着DOX浓度的增大 ......