大鼠血管平滑肌细胞的原代培养及鉴定(2)
2 结果
原代培养时，组织块接种于培养瓶内第4-6天即可见有数个细胞以垂直方向从组织块边缘游出，游出细胞渐向外生长形成细胞晕，进而形成细胞簇，14天左右即可见细胞呈典型的“峰谷”样生长，光镜观察细胞形态多样，呈梭形、星形或不规则形，大小略有差异，胞体较小，胞质折光性强；传代后VSMC突起增多， 胞质伸展，较多分枝状突起，细胞周界不清、透明度增高，折光性下降。VSMC胞核多为卵圆形，有一个或多个核仁；胞浆丰富，有时有暗色颗粒，少数细胞有双核或三核，有时有暗色颗粒，细胞间常有突起相连。传代血管平滑肌细胞：光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察：细胞形态不规则，胞浆内有肌丝，纵向平行排列，有密区，具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后平滑肌细胞的3种标记分子(SMA、SM22、Calponin)呈阳性表达，可见细胞胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色。证明所培养的细胞都是平滑肌细胞，纯度达98%以上。血管平滑肌细胞在冻存复苏后任能旺盛生长。
3 讨论
血管平滑肌细胞异常增殖和迁移是所有损伤性血管疾病的共同病理生理学改变 ......
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原代培养时，组织块接种于培养瓶内第4-6天即可见有数个细胞以垂直方向从组织块边缘游出，游出细胞渐向外生长形成细胞晕，进而形成细胞簇，14天左右即可见细胞呈典型的“峰谷”样生长，光镜观察细胞形态多样，呈梭形、星形或不规则形，大小略有差异，胞体较小，胞质折光性强；传代后VSMC突起增多， 胞质伸展，较多分枝状突起，细胞周界不清、透明度增高，折光性下降。VSMC胞核多为卵圆形，有一个或多个核仁；胞浆丰富，有时有暗色颗粒，少数细胞有双核或三核，有时有暗色颗粒，细胞间常有突起相连。传代血管平滑肌细胞：光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察：细胞形态不规则，胞浆内有肌丝，纵向平行排列，有密区，具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后平滑肌细胞的3种标记分子(SMA、SM22、Calponin)呈阳性表达，可见细胞胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色。证明所培养的细胞都是平滑肌细胞，纯度达98%以上。血管平滑肌细胞在冻存复苏后任能旺盛生长。
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血管平滑肌细胞异常增殖和迁移是所有损伤性血管疾病的共同病理生理学改变 ......
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