大鼠血管平滑肌细胞的原代培养及鉴定(1)

http://www.100md.com 2014年3月1日 《特别健康·下半月》2014年第3期

     【摘要】 目的：探讨大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养的方法，观察其生长特性，为相关研究提供实验材料。方法：组织块贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞，胰酶消化法进行传代，倒置显微镜观察细胞生长特点，用平滑肌细胞的3种标记分子(SMA、SM22、Calponin)免疫细胞化学法鉴定细胞的纯度，掌握细胞的冻存与复苏。结果：织块接种于培养瓶内4-6天即可见数个细胞以垂直方向从组织块边缘游出， 培养至2周游出细胞逐渐向组织块周围生长形成细胞晕， 进而形成细胞簇，镜下可见细胞呈典型的“峰”“谷”样生长，免疫细胞化学显示平滑肌细胞的3种标记分子均为阳性表达。结论：组织块贴壁法简便、经济，培养的平滑肌细胞数量多、生长状态良好，为研究心血管疾病提供良好的体外模型。

    【关键词】 大鼠；血管平滑肌细胞；原代培养；冻存；复苏

    【中图分类号】R329 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019(2014)03-0045-01

    血管平滑肌细胞(VSMC)的异常增殖是许多心血管疾病的共同病理基础，在高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等许多血管性疾病中，都涉及到血管平滑肌细胞的异常增殖[1]。血管由3个部分组成，自内向外依次是内膜层、中膜层和外膜层 ......