重组人表皮生长因子融合蛋白发酵条件优化(1)
【摘 要】目的:优化GST-hEGF融合蛋白工程菌pGEX-EGF/BL21STAR(DE3)pLysS 30L发酵罐培养及表达条件。方法:上罐发酵采用M9-YT-Glu发酵培养基,IPTG诱导;通过还原SDS-PAGE法测定目标蛋白表达量、落计数法测定质粒丢失率,以确定表达温度、时间以及IPTG添加量等参数。结果与讨论:hEGF重组菌诱导温度为30℃、加入终浓度0.2M IPTG诱导,维持诱导时间4hr,目的蛋白表达量占菌体蛋白总量的30%左右,为后续rEGF融合蛋白纯化奠定了基础。【关键词】人表皮生长因子;融合蛋白;发酵条件优化
【中图分类号】R786 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851(2018)04-0-01
人表皮生長因子(hEGF)由Cohen等人于1975年从人体尿液中分离得到,又被称为抑胃素(Urogastrone)[1]。hEGF在多种疾病(如角膜损伤和糖尿病足等)的治疗中体现出显著的效果[2],其药用开发具有巨大的潜力;同时 ......
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