探讨不同方法对结核菌检测的临床比较
【摘 要】目的：探讨BD960快速结核菌培养与罗氏结核菌培养在结核菌检验中的结果分析。方法：随机选取2017年我院500例患者的痰液标本先抗酸染色后记录涂片结果，然后同时接种于罗氏培养基与BD960结核菌培养进行检测，并对其结果进行分析。结果：500例痰标本涂阳结果123例，涂阴结果377例，其中涂阳的123例中BD960培养全为阳性，阳性率100%，罗氏结核菌培养阳性120例，阳性率97.6%，涂阴的377例中BD960培养阳性45例，阳性率11.9%，罗氏结核菌培养阳性14例，阳性率3.71%，污染率在涂阳的123例中罗氏培养2.44%，BD960培养0.81%，在涂阴的377例中罗氏培养污染率3.45%.，BD960培养1.59%，阳性结果出现时间罗氏结核菌培养最早13天，平均18.5天，BD960培养最早4天，平均9天。结论：BD960快速结核菌培养比传统的罗氏培养阳性率高，污染率低，培养时间也比罗氏结核菌培养明显缩短，自动化程度高，所以在结核病的早期诊断中具有重要的临床价值。
【关键词】罗氏结核菌培养；BD960快速结核菌培养；抗酸杆菌涂片
【中图分类号】R378.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851(2018)08--02
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病。结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。结核病是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病。潜伏期4～8周。其中80%发生在肺部，其他部位(颈淋巴、脑膜、腹膜、肠、皮肤、骨骼)也可继发感染。人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。传染源是接触排菌的肺结核患者。近年来，随着环境污染和艾滋病的传播，结核病发病率越发强烈。全球感染结核病菌的病例逐年上升，至今大约三分之一的全球人口被感染，因感染结核菌死亡的人数超过其它任何一种传染病。在发展中国家有25%因结核病死亡的患者是可挽救的，由于诊断治疗的延误以及不规范用药导致的多重耐药菌株对结核病患者直接构成致命的威胁，因此对结核分枝杆菌的感染进行快速诊断和鉴定是有效治疗和控制其传播的首要措施。本实验旨在通过对两种不同方法检测结核菌的阳性率与污染率以及培养阳性时间的比较，探讨其临床诊断评价，对结核菌的检测具有重要的临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 随机抽取2017年我院结核病患者的500例痰标本，其中，男性275例，女性225例，年龄在18～60岁之间，平均年龄39岁，患者的年龄，性别等资料无显著差异。
1.2 方法 BD960结核菌培养是将痰液消化，离心，沉淀后将其接种到液体培养管，培养管的成分为改良的培养肉汤，10%CO2，管底包埋對O2浓度敏感的荧光物质。当管内有结核分枝杆菌生长时，管内O2浓度下降，管底荧光显示剂在特定光源激发下释放荧光，其强度变化直接反映管内分枝杆菌生长情况，从而快速判断是否有分枝杆菌生长。
传统的罗氏结核菌培养前处理与BD960培养相同，不同的是接种的培养基为罗氏斜面培养基。培养基含有细菌生长所必需的碳源、氮源、无机盐等生长元素，能满足结核分枝杆菌良好的生长环境，然后置35℃温箱内培养1～4周，观察结果。菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。
1.3 观察指标 记录检验结果，比较两种方法的阳性检出率，分析检验数据。
1.4 统计学方法 采用SPSS22.0软件予以统计学分析，临床资料采取检验(计数)，P<0.05说明差异具有统计学意义。
2 结果
经比较，BD960结核菌培养的阳性率高于罗氏结核菌培养，污染率低于罗氏结核菌培养，阳性出现时间短，差异有统计学意义。(P<0.05)见表1
3 讨论
结核病是全世界首屈一指的传染病杀手，每天夺走4500多人的生命。其病程长，病死率高。罗氏培养基由于内含孔雀绿可抑制杂菌的生长，所以便于用于结核菌的分离和长期培养。并作为结核病诊断的“金标准”。[1]该方法简单、经济，易于推广使用。但由于结核分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质的吸收，故在一般培养基中每分裂一代需要18-24小时，其分裂周期长，生长繁殖缓慢，阳性检出率低，不易标准化，给临床的及时诊断和治疗带来诸多困难。[2]所以迫切需要一种快速、简便的技术方法，能够在最短时间内提高结核菌的检出率，缩短患者诊断和治疗所需的时间。BD960快速结核菌培养就是在这样的背景下研发成功，使快速分离结核分枝杆菌成为现实。由于液体培养基中接触营养面大，细菌生长较为迅速。一般1～2周即可生长。本实验结果表明，痰涂片检查并不能鉴定细菌活力与分枝杆菌菌种，痰涂片阳性结果并不能真正反映患者在化疗过程中的病理进展情况，痰涂片阴性结果中仍有标本结核菌培养为阳性，所以仅以痰涂片检查结果作为痰菌是否转阴的结果是不全面的。[3]而两种培养方法中，无论痰涂片是阳性和阴性的患者，BD960快速结核菌培养的阳性率均高于罗氏结核菌培养，差异有统计学意义。(P<0.05)在本组的500例痰标本中，罗氏培养污染16例，BD960培养污染7例，BD960快速培养的污染率明显低于罗氏培养，差异有统计学意义。(P<0.05)
同时从两种培养方法出现结果的时间显示，传统的罗氏培养时间需要56天左右没有结核菌生长才能判定为阴性，而BD960快速结核菌培养只需要42天左右。其中，阳性结果的出现时间，BD960快速液体培养比罗氏培养也明显缩短。
结核病的确诊主要依靠病原学检查。抗酸染色涂片法阳性率低且不能区分死菌与活菌。结核菌的分裂周期较长，用传统的罗氏培养法检测，虽然方法简单，经济，易于推广，但培养周期长，难以满足临床对结核病的诊断和治疗。而BD960液体结核菌培养法检测分枝杆菌，具有自动化程度高，阳性率高，污染率低，检测时间短等优点，在结核病的早期诊断中具有重要的应用价值，值得临床推广使用。
参考文献
吴雪琼，张宗德，乐军。分支杆菌分子生物学[M]。北京；人民军医出版社，2010；2-3。
于景波，结核菌分离培养方法对照与分析[J]。中国保健，2010，18(3)：131-132。
胡真宝，王芸蕾，柳正卫。初治涂阳肺结核患者147例治疗两个月末痰培养结果分析[J]。中国基层医药，2012，19(11)：1601-1602。 (张皎月)
【关键词】罗氏结核菌培养；BD960快速结核菌培养；抗酸杆菌涂片
【中图分类号】R378.91 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851(2018)08--02
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病。结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。结核病是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病。潜伏期4～8周。其中80%发生在肺部，其他部位(颈淋巴、脑膜、腹膜、肠、皮肤、骨骼)也可继发感染。人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。传染源是接触排菌的肺结核患者。近年来，随着环境污染和艾滋病的传播，结核病发病率越发强烈。全球感染结核病菌的病例逐年上升，至今大约三分之一的全球人口被感染，因感染结核菌死亡的人数超过其它任何一种传染病。在发展中国家有25%因结核病死亡的患者是可挽救的，由于诊断治疗的延误以及不规范用药导致的多重耐药菌株对结核病患者直接构成致命的威胁，因此对结核分枝杆菌的感染进行快速诊断和鉴定是有效治疗和控制其传播的首要措施。本实验旨在通过对两种不同方法检测结核菌的阳性率与污染率以及培养阳性时间的比较，探讨其临床诊断评价，对结核菌的检测具有重要的临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 随机抽取2017年我院结核病患者的500例痰标本，其中，男性275例，女性225例，年龄在18～60岁之间，平均年龄39岁，患者的年龄，性别等资料无显著差异。
1.2 方法 BD960结核菌培养是将痰液消化，离心，沉淀后将其接种到液体培养管，培养管的成分为改良的培养肉汤，10%CO2，管底包埋對O2浓度敏感的荧光物质。当管内有结核分枝杆菌生长时，管内O2浓度下降，管底荧光显示剂在特定光源激发下释放荧光，其强度变化直接反映管内分枝杆菌生长情况，从而快速判断是否有分枝杆菌生长。
传统的罗氏结核菌培养前处理与BD960培养相同，不同的是接种的培养基为罗氏斜面培养基。培养基含有细菌生长所必需的碳源、氮源、无机盐等生长元素，能满足结核分枝杆菌良好的生长环境，然后置35℃温箱内培养1～4周，观察结果。菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。
1.3 观察指标 记录检验结果，比较两种方法的阳性检出率，分析检验数据。
1.4 统计学方法 采用SPSS22.0软件予以统计学分析，临床资料采取检验(计数)，P<0.05说明差异具有统计学意义。
2 结果
经比较，BD960结核菌培养的阳性率高于罗氏结核菌培养，污染率低于罗氏结核菌培养，阳性出现时间短，差异有统计学意义。(P<0.05)见表1
3 讨论
结核病是全世界首屈一指的传染病杀手，每天夺走4500多人的生命。其病程长，病死率高。罗氏培养基由于内含孔雀绿可抑制杂菌的生长，所以便于用于结核菌的分离和长期培养。并作为结核病诊断的“金标准”。[1]该方法简单、经济，易于推广使用。但由于结核分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质的吸收，故在一般培养基中每分裂一代需要18-24小时，其分裂周期长，生长繁殖缓慢，阳性检出率低，不易标准化，给临床的及时诊断和治疗带来诸多困难。[2]所以迫切需要一种快速、简便的技术方法，能够在最短时间内提高结核菌的检出率，缩短患者诊断和治疗所需的时间。BD960快速结核菌培养就是在这样的背景下研发成功，使快速分离结核分枝杆菌成为现实。由于液体培养基中接触营养面大，细菌生长较为迅速。一般1～2周即可生长。本实验结果表明，痰涂片检查并不能鉴定细菌活力与分枝杆菌菌种，痰涂片阳性结果并不能真正反映患者在化疗过程中的病理进展情况，痰涂片阴性结果中仍有标本结核菌培养为阳性，所以仅以痰涂片检查结果作为痰菌是否转阴的结果是不全面的。[3]而两种培养方法中，无论痰涂片是阳性和阴性的患者，BD960快速结核菌培养的阳性率均高于罗氏结核菌培养，差异有统计学意义。(P<0.05)在本组的500例痰标本中，罗氏培养污染16例，BD960培养污染7例，BD960快速培养的污染率明显低于罗氏培养，差异有统计学意义。(P<0.05)
同时从两种培养方法出现结果的时间显示，传统的罗氏培养时间需要56天左右没有结核菌生长才能判定为阴性，而BD960快速结核菌培养只需要42天左右。其中，阳性结果的出现时间，BD960快速液体培养比罗氏培养也明显缩短。
结核病的确诊主要依靠病原学检查。抗酸染色涂片法阳性率低且不能区分死菌与活菌。结核菌的分裂周期较长，用传统的罗氏培养法检测，虽然方法简单，经济，易于推广，但培养周期长，难以满足临床对结核病的诊断和治疗。而BD960液体结核菌培养法检测分枝杆菌，具有自动化程度高，阳性率高，污染率低，检测时间短等优点，在结核病的早期诊断中具有重要的应用价值，值得临床推广使用。
参考文献
吴雪琼，张宗德，乐军。分支杆菌分子生物学[M]。北京；人民军医出版社，2010；2-3。
于景波，结核菌分离培养方法对照与分析[J]。中国保健，2010，18(3)：131-132。
胡真宝，王芸蕾，柳正卫。初治涂阳肺结核患者147例治疗两个月末痰培养结果分析[J]。中国基层医药，2012，19(11)：1601-1602。 (张皎月)