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编号:13428960
灵杆菌核酸酶重组表达工艺研究
http://www.100md.com 2020年2月1日 《特别健康·下半月》 2020年第2期
     【摘要】目的:优化灵杆菌核酸酶(NU)工程菌pET3c-NU/BL21STAR(DE3)pLysS 30L发酵罐培养及表达条件。方法:上罐发酵采用M9-YT-Glu发酵培养基,IPTG诱导;通过还原SDS-PAGE法测定目标蛋白表达量,RP-HPLC法测定乙酸残留量,以确定表达温度、时间等参数。结果:与讨论]NU重组菌诱导温度为30℃、加入终浓度0.2M IPTG诱导,维持诱导时间4hr,目的蛋白表达量占菌体蛋白总量的30%左右,为后续rNU融合蛋白纯化奠定了基础。

    【关键词】灵杆菌核酸酶;重組表达;发酵条件优化

    【中图分类号】R543

    【文献标识码】B

    【文章编号】2095-6851(2020)02-045-01

    中国分类号 Q786 文献标识码 A

    在人用预防及治疗类生物制品的质量标准中,核酸残留量是重要指标,直接关系到产品的安全性。在疫苗工业及蛋白质和多糖类工业中,应用灵杆菌核酸酶可将产品中的核酸污染降低至皮克级,目前,该方法已成为通用做法。我国是疫苗使用和生产大国 ......

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