心梗三合一快速诊断的方法学评价
作者简介：薛红蕾 ，女， 主管技师，大学，研究方向：预防医学及检验
摘要：目的 用胶体金法对CTnI、CK-MB、mb进行定性检测，并对其进行方法学评价。方法 金标法测定部分心肌梗死和外伤病人血清中的CTnI、CK-MB、mb，用混合血清分别作准确性试验、精密度试验、线性试验及干扰试验。结果 准确性试验的回收率为98.7%，精密度试验的日内变异系数为1.67%，日间变异系数为2.13%，完全符合精密测量的要求.结论 表明本方法的特异性和敏感性均较理想。检测时间仅9min，完全能满足急诊检测的要求
关键词：胶体金 心梗三合一方法学评价
心肌梗死三合一快速诊断包括：肌钙蛋白I(CTnI)，肌红蛋白(mb)，肌酸肌酶同功酶(CK—MB)。心肌梗死的早期诊断中mb与CK—MB出现的较早，亦可反映心肌损伤的程度。但缺乏特异性。而CTnI是早期特异性指标，心梗患者胸痛发作4小时内CTnI水平即超过正常，12小时达到高峰【1】。症状发作144小时内均可检验到其水平增高，但是有近20%的心梗患者CTnI呈阴性。所以临床全面快速诊断心梗有赖于对mb，CK—MB及CrnI三指标的联合检测。本文采用胶体金法对CTnI、CK-MB、mb进行定性检测，并对其进行方法学评价。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 材料 取部分病人血清制成混合血清；自2013年4月至9月选取部分心肌梗死和外伤病人的血清若干。
1.2 方法 金标法，美国CRON心梗三合一试剂盒，英国朗道CK—MB、CTnI、mb质控液。按操作要求对试剂检验后检测标本的CK—MB、CTnI、mb含量。用混合血清分别作准确性试验、精密度试验、线性试验及干扰试验(包括胆红素、甘油三酯、EDTA的干扰)。测定部分心肌梗死和外伤病人的血清若干。
2、统计学方法
采用SPSS10.0软件。相关分析采用直线相关分析，组间比较采用t检验。
1.2.1 准确性试验以回收试验来测试本方法的准确度。取病人混合血清各400ul，分别加20 ml蒸馏水、20 ul CK—MB、CTnI、mb质控液(12.3ng/ml)、20 ul CK—MB、CTnI、mb (24.6ng/ml)，分别测定其CK—MB、CTnI、mb，平均回收率为98.7%。
, 百拇医药
1.2.2 精密度试验以重复性试验来测试本方法的精密度。(1)日内重复性试验：取病人混合血清500ul，在一天内重复20次测定CK—MB、CTnI、mb。(2)日间重复性试验：将病人混合血清分装成200ul~20支，冰冻保存，每天测定1支，连续20d。线性范围的测定：取一病人标本，不经稀释测得其CK—MB、CTnI、mb，以手工进行1:1、1:2、1:3倍稀释，再分别测其CK—MB、CTnI、mb，测得阳性率值分别为95%、96%、93.3%。用93.2%的标本作线性范围测得：相关系数r=-0.993。
1.2.3 干扰试验分别以胆红素、甘油三酯、EDTA作干扰物做回收试验：(1)胆红素对试验的影响：取混合血清各400 ul，分别加入20 ml蒸馏水、20ul (50umol/L)的胆红素溶液、20ul (100umol/L)的胆红素溶液，分别测定其CK—MB、CTnI、mb阳性率值，测得平均干扰浓度为0 ng/ml；(2)甘油三酯对试验的影响：取混合血清各400ul，分别加入20ml蒸馏水、20 ul( 13.1umol/L0的TG、20ul (23.2umol/L)的TG，分别测定其CK—MB、CTnI、mb值，测得平均干扰浓度为0.02ng/ml；(3)EDTA对试验的影响：取混合血清各400ul，分别加人20ul蒸馏水、20ul(13.1umol/L)的EDTA、20ul (23.21umol/L)的EDTA，分别测定其CK—MB、CTnI、mb阳性率值，测得平均干扰浓度为0.02ng/ml；临床病例测定：测定2011年4月至8月部分经临床及影像诊断确诊的心肌梗死和外伤病人的血清CK—MB，结果均有明显升高。
, http://www.100md.com
1.3 质控方法采用朗道公司提供的心肌质控品 (含高、中值)，以多规则SHEWAD质控规则进行质控。
2 结果
准确性试验的回收率为98.7%，精密度试验的日内变异系数为1.67%，日间变异系数为2.13%，完全符合精密测量的要求。本文测得最大线性范围约为357.7ng/ml，这与试剂说明书所提供的500ng/ml有较大出入。在0～357.7ng/ml范围内，相关系数为0.993，线性良好。胆红素、EDTA、甘油三酯对本法测定CK—MB、CTnI、mb无明显影响。临床病例测定结果表明，对于心肌细胞损伤，CK—MB、CTnI、mb有较好的特异性和敏感性。
3 讨论
本方法测定CK—MB、CTnI、mb，其准确性、精密度均十分理想，胆红素、EDTA、甘油三酯对本法测定CK—MB、CTnI、mb无明显影响。当标本中CK—MB、CTnI、mb含量较高时，应引起警惕，最好进行稀释重测。本方法与传统的测定CK—MB、CTnI、mb免疫抑制原理的方法相比，两者原理不同，故本文选取若干病人标本来验证其方法的可行性，结果表明本方法的特异性和敏感性均较理想。检测时间仅9min，完全能满足急诊检测的要求。所以本文认为用金标法对CK—MB、CTnI、mb的定性检测完全可以替代以免疫抑制原理检测CK—MB、CTnI、mb的方法。
参考文献
【1】 李梅 石矿 柴树红 心肌梗死三合一快速诊断的临床应用 检验医学与临床(J) 2008(18) :1133-1134, 百拇医药(薛红蕾 吴志平)
摘要：目的 用胶体金法对CTnI、CK-MB、mb进行定性检测，并对其进行方法学评价。方法 金标法测定部分心肌梗死和外伤病人血清中的CTnI、CK-MB、mb，用混合血清分别作准确性试验、精密度试验、线性试验及干扰试验。结果 准确性试验的回收率为98.7%，精密度试验的日内变异系数为1.67%，日间变异系数为2.13%，完全符合精密测量的要求.结论 表明本方法的特异性和敏感性均较理想。检测时间仅9min，完全能满足急诊检测的要求
关键词：胶体金 心梗三合一方法学评价
心肌梗死三合一快速诊断包括：肌钙蛋白I(CTnI)，肌红蛋白(mb)，肌酸肌酶同功酶(CK—MB)。心肌梗死的早期诊断中mb与CK—MB出现的较早，亦可反映心肌损伤的程度。但缺乏特异性。而CTnI是早期特异性指标，心梗患者胸痛发作4小时内CTnI水平即超过正常，12小时达到高峰【1】。症状发作144小时内均可检验到其水平增高，但是有近20%的心梗患者CTnI呈阴性。所以临床全面快速诊断心梗有赖于对mb，CK—MB及CrnI三指标的联合检测。本文采用胶体金法对CTnI、CK-MB、mb进行定性检测，并对其进行方法学评价。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 材料 取部分病人血清制成混合血清；自2013年4月至9月选取部分心肌梗死和外伤病人的血清若干。
1.2 方法 金标法，美国CRON心梗三合一试剂盒，英国朗道CK—MB、CTnI、mb质控液。按操作要求对试剂检验后检测标本的CK—MB、CTnI、mb含量。用混合血清分别作准确性试验、精密度试验、线性试验及干扰试验(包括胆红素、甘油三酯、EDTA的干扰)。测定部分心肌梗死和外伤病人的血清若干。
2、统计学方法
采用SPSS10.0软件。相关分析采用直线相关分析，组间比较采用t检验。
1.2.1 准确性试验以回收试验来测试本方法的准确度。取病人混合血清各400ul，分别加20 ml蒸馏水、20 ul CK—MB、CTnI、mb质控液(12.3ng/ml)、20 ul CK—MB、CTnI、mb (24.6ng/ml)，分别测定其CK—MB、CTnI、mb，平均回收率为98.7%。
, 百拇医药
1.2.2 精密度试验以重复性试验来测试本方法的精密度。(1)日内重复性试验：取病人混合血清500ul，在一天内重复20次测定CK—MB、CTnI、mb。(2)日间重复性试验：将病人混合血清分装成200ul~20支，冰冻保存，每天测定1支，连续20d。线性范围的测定：取一病人标本，不经稀释测得其CK—MB、CTnI、mb，以手工进行1:1、1:2、1:3倍稀释，再分别测其CK—MB、CTnI、mb，测得阳性率值分别为95%、96%、93.3%。用93.2%的标本作线性范围测得：相关系数r=-0.993。
1.2.3 干扰试验分别以胆红素、甘油三酯、EDTA作干扰物做回收试验：(1)胆红素对试验的影响：取混合血清各400 ul，分别加入20 ml蒸馏水、20ul (50umol/L)的胆红素溶液、20ul (100umol/L)的胆红素溶液，分别测定其CK—MB、CTnI、mb阳性率值，测得平均干扰浓度为0 ng/ml；(2)甘油三酯对试验的影响：取混合血清各400ul，分别加入20ml蒸馏水、20 ul( 13.1umol/L0的TG、20ul (23.2umol/L)的TG，分别测定其CK—MB、CTnI、mb值，测得平均干扰浓度为0.02ng/ml；(3)EDTA对试验的影响：取混合血清各400ul，分别加人20ul蒸馏水、20ul(13.1umol/L)的EDTA、20ul (23.21umol/L)的EDTA，分别测定其CK—MB、CTnI、mb阳性率值，测得平均干扰浓度为0.02ng/ml；临床病例测定：测定2011年4月至8月部分经临床及影像诊断确诊的心肌梗死和外伤病人的血清CK—MB，结果均有明显升高。
, http://www.100md.com
1.3 质控方法采用朗道公司提供的心肌质控品 (含高、中值)，以多规则SHEWAD质控规则进行质控。
2 结果
准确性试验的回收率为98.7%，精密度试验的日内变异系数为1.67%，日间变异系数为2.13%，完全符合精密测量的要求。本文测得最大线性范围约为357.7ng/ml，这与试剂说明书所提供的500ng/ml有较大出入。在0～357.7ng/ml范围内，相关系数为0.993，线性良好。胆红素、EDTA、甘油三酯对本法测定CK—MB、CTnI、mb无明显影响。临床病例测定结果表明，对于心肌细胞损伤，CK—MB、CTnI、mb有较好的特异性和敏感性。
3 讨论
本方法测定CK—MB、CTnI、mb，其准确性、精密度均十分理想，胆红素、EDTA、甘油三酯对本法测定CK—MB、CTnI、mb无明显影响。当标本中CK—MB、CTnI、mb含量较高时，应引起警惕，最好进行稀释重测。本方法与传统的测定CK—MB、CTnI、mb免疫抑制原理的方法相比，两者原理不同，故本文选取若干病人标本来验证其方法的可行性，结果表明本方法的特异性和敏感性均较理想。检测时间仅9min，完全能满足急诊检测的要求。所以本文认为用金标法对CK—MB、CTnI、mb的定性检测完全可以替代以免疫抑制原理检测CK—MB、CTnI、mb的方法。
参考文献
【1】 李梅 石矿 柴树红 心肌梗死三合一快速诊断的临床应用 检验医学与临床(J) 2008(18) :1133-1134, 百拇医药(薛红蕾 吴志平)
参见：首页 > 医疗版 > 疾病专题 > 心血管科 > 冠状动脉病 > 心肌梗塞