自噬相关蛋白在牙周病发生发展中作用的研究
显微镜,牙龈,1研究资料及方法,2方法,3观察指标及判定标准,4统计学方法,2结果,1致炎反应作用后两组LC3B的表达情况,2致炎反应作用后两组LC3Av1的表达情况,3讨论
郝 鸿(华中科技大学医院,湖北 武汉 430074)
牙周病是指由牙菌斑的刺激产物引起的牙周组织炎性疾病。牙周病会破坏牙支持组织,会导致牙龈红肿、疼痛、出血,进一步发展后可导致牙槽骨的吸收,继而导致牙齿松动、移位、脱落。正常情况下,自噬是一种常见的细胞现象,既能抑制也能促进细胞凋亡,这两种反应在生物体内均广泛存在。在营养缺乏时,自噬反应是一个细胞的促活反应机制,但是过度的自噬反应也会导致细胞死亡[1]。口腔卫生不佳时,大量的细菌会影响牙周生态系统;一旦细菌数量过多,牙龈上皮细胞会处于相对营养匮乏的状态,这极易导致其死亡。有研究[2-3]表明,自噬相关蛋白与牙周病的发生发展密切相关。本文针对自噬相关蛋白在牙周病发生发展中的作用进行初步探讨。现报告如下:
1 研究资料及方法
1.1 研究资料
选取我院近3 年(2019 年1 月至2022 年1 月期间)收治的牙周病患者86 例作为观察组,选择同期在我院进行同牙位正畸治疗但牙周健康的患者30 例作为对照组。回顾分析两组的临床资料。观察组:男47 例,女39 例;年龄20 ~55 岁,平均(37.54±2.16)岁。对照组:男17 例,女13 例;年龄21 ~53 岁,平均(37.23±2.36)岁。两组的基本资料相比均衡性良好(P>0.05) ,有可比性。
1.2 方法
两组患者均分别采集牙周袋标本:采集菌斑,选择吸潮纸,蘸取龈沟液,放入牙周袋15 s 后取出,剪下尖端放入离心管。将采集的样本放入灭菌PBS 中保存(-20℃)。实验室检测方法:离心,弃上清,加入1 mL 胶原酶;放入孵育箱45 min(每5 min 振荡1 次);离心,弃上清,用10% 胎牛血清培养液冲洗,重复3次。吸出组织块,种入培养瓶(含有2 mL 20% 胎牛血清培养液)中。加入500 μL 20% 胎牛血清培养液,待细胞从组织块中游出,然后再添加培养液。置于显微镜下观察。使用1 mg/L 脂多糖刺激上述细胞,引起致炎反应,作用时间为48 h。
1.3 观察指标及判定标准
两组均应用免疫组织化学染色法检测微管相关蛋白1 轻链3 B(LC3B)、微管相关蛋白1 轻链3 Av1(LC3Av1)的表达情况 ......
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