王 卿，周新宇

    (江苏省无锡市中医医院药学部，江苏 无锡 214000)

    中药是传统医学的重要组成部分，它们通常由复杂的天然植物和动物组成，具有多样的化学成分。传统的中药鉴定方法主要基于形态学﹑化学成分分析和药效评估等传统方法，但这些方法存在着一定的局限性。近年来，PCR 技术的广泛应用为中药鉴定提供了新的机会。PCR技术可以通过放大目标DNA 序列来检测中药样品，并且具有高灵敏度﹑高特异性和高重复性等优点。

    1 PCR 技术原理

    PCR 技术是一种体外DNA 扩增技术，它包括三个关键步骤：变性﹑引物结合和延伸。PCR 技术利用DNA聚合酶的热稳定性，反复进行高温变性﹑引物退火和延伸反应，从而在无须细胞和基因库的条件下，快速产生大量目标DNA 序列[1]。

    1.1 PCR-RFLP 技术

    PCR-RFLP(聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性)技术是一种用于分子鉴定和检测样品中掺杂成分的方法，它结合了PCR 技术和限制性内切酶酶切分析，可以实现对样品的半定量检测。

    有研究指出[2]，在PCR 反应中使用这些DNA 模板进行扩增，并选择适当的限制性内切酶进行酶切，由于川贝母和伪品具有不同的DNA 序列，限制性内切酶在两者中会产生不同长度的DNA 片段。这些片段通过凝胶电泳进行分离和可视化。最后，研究人员使用专业的软件来分析凝胶电泳图像上的条带强度，通过比较川贝母样品与不同掺伪比例样品的条带强度，来计算掺伪量的大致比例。这种方法直观地提供了掺假﹑掺伪样品的半定量结果[3]。

    1.2 PCR 常常结合其他技术

    有研究指出[4]，在实际应用中，PCR 常常结合其他技术进行综合分析，以提高鉴定的准确性和可靠性。除了基本的PCR 技术，还有一些快速﹑小样本﹑高通量的技术在中药种属及品质鉴定中得到广泛发展和应用，包括基因芯片﹑一代测序(结合有中药指纹技术)和新一代测序(NGS)技术。

    还有研究指出[5]，基因芯片技术是一种高通量的DNA 分析方法，可以同时对上千个DNA 序列进行扩增和检测 ......