李文杰，王开阳

    (中国航空规划设计研究总院有限公司，北京 100120)

    狂犬病作为迄今为止人类病死率最高的急性传染病之一，一旦发病，死亡率接近100%[1]。其是一种由狂犬病毒引起的人兽共患传染病，有着对所有温血动物都易感的特性，犬类是主要宿主。当人类被患有狂犬病的宠物咬伤后，宠物唾液中的狂犬病毒经破损皮肤侵入人体，引发感染。经过多年发展，神经组织疫苗、禽胚疫苗、细胞培养疫苗等狂犬疫苗相继问世，使狂犬病得到了有效的控制。

    1 工艺流程简述

    本文以国内较为成熟的Vero细胞狂犬疫苗为例，对疫苗生产工艺流程进行介绍[2]：

    (1)细胞培养

    细胞从细胞库中取出后复苏，将复苏后的单层细胞消化，分散成均匀的细胞，加入培养液置于适宜温度下培养成均匀单层细胞。

    (2)病毒培养、接种

    将人用狂犬疫苗减毒株稀释到适宜浓度后，接种于工作代Vero细胞上。

    (3)病毒收获

    接种后的Vero细胞经培养，更换维持液后，进行多次病毒液收获。

    (4)病毒收获液合并、浓缩

    检定合格的同一细胞批生产的病毒收获液进行合并后，经超滤或其他适宜方法浓缩至规定的蛋白质含量范围。

    (5)病毒灭活

    向浓缩后的病毒收获液中加入β-丙内酯进行灭活，然后置于独立设置的待验区，待灭活结果验证通过后进入下一工序。

    (6)纯化

    完全灭活后的病毒液经柱色谱法等方法进行纯化，纯化后取样、调节pH值并加入人血白蛋白等稳定剂制备为原液。

    (7)半成品制备

    已制备完成的原液按要求的同一蛋白质含量或抗原含量进行配制，且总蛋白质含量应不高于80 μg/ 剂，加入适宜的稳定剂即为半成品。

    (8)分装、包装

    配制完成的半成品在分装车间完成灌装，之后在包装车间装盒装箱后入库。

    工艺流程如图1所示。

    图1 狂犬疫苗生产流程Fig.1 Technological process of the rabies vaccine production

    2 工艺设计分析

    2.1 设计难点

    欧盟在其灭菌决策指南中 ......