尹丽慧，熊术道，叶爱芳，韩义香，章圣辉，吴建波

    (温州医学院附属第一医院 内科实验室，浙江 温州 325000)

    苦瓜蛋白是从苦瓜种籽中分离出来的一种碱性糖蛋白，属于I型植物核糖体失活蛋白(ribosomal inactivating protein，RIP)，其 RNA N-糖苷酶活性能使真核细胞核糖体28S rRNA第4323位腺嘌呤糖苷键水解、断裂，从而无法与延长因子2结合并导致60S亚基失活，进而使蛋白质的合成受到不可逆的抑制。近年来，陆续有研究表明，I型RIP具有抗肿瘤作用，而其抗肿瘤作用依赖于其介导的细胞凋亡。我们以往的研究也表明，苦瓜蛋白具有良好的抗肿瘤作用，并能诱导肿瘤细胞凋亡[1-2]。Pongnikom等[3]研究发现宫颈癌患者在化疗过程中同时服用苦瓜45～90 d，其P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)水平明显下降，而单纯化疗的患者P-gp表达没有改变，提示苦瓜中某种成分具有下调P-gp表达的作用。但目前有关苦瓜蛋白对耐药肿瘤细胞作用的研究国内外少有报道。本研究以多药耐药(multi-drug resistance，MDR)K562/A02细胞为模型，从细胞凋亡、P-gp表达及caspase活性等方面研究苦瓜蛋白对K562/A02的细胞生物学作用，探讨苦瓜蛋白对耐药肿瘤细胞作用的分子机制，以期为白血病多药耐药治疗寻找一种新的药物。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验材料：多药耐药细胞株K562/A02购自中国医学科学院血液学研究所；苦瓜蛋白由本实验室提取[2]。

    1.1.2 试剂：RPMI1640(美国GIBCO公司)；胎牛血清(天津市正江高科技有限公司)；100×青霉素-链霉素双抗液(美国GIBCO公司)；CCK-8(日本同仁化学研究所)；Annexin V kit(Bender Medsystems公司)；荧光标记单抗(BD公司)；caspase-8 kit(联科公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养：K562/A02细胞用含10%FBS ......