彭艳艳，孙丽娜，宋菁，金露，王小同

    (温州医学院附属第二医院 脑科、康复中心，浙江 温州 325027)

    低氧是一种常见的应激，可引起机体结构及功能的改变，其结果随着低氧的程度、持续时间、机体反应性的不同而异。低氧可广泛影响机体的多个系统，包括神经系统、呼吸循环系统和肌肉骨骼系统等。骨骼肌作为人体最大的组织，为机体的活动提供动力。低氧可引起机体低氧应激，从而导致骨骼肌结构和功能的变化[1-3]。线粒体(mitochondria)作为机体的“能量工厂”，是机体利用氧进行呼吸功能和生成ATP的重要细胞器。低氧应激可引起线粒体功能障碍[4]。同时线粒体也与细胞凋亡和肿瘤的发生密切相关[5]。本实验旨在通过利用低氧导致小鼠骨骼肌离体线粒体低氧的模型，探讨低氧对小鼠骨骼肌离体线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore，MPTP)功能的影响。

    1 材料和方法

    1.1 动物与分组 SPF级C57BL/6雄性小鼠32只(由温州医学院实验动物中心提供)，体质量20～28 g，7～9周龄，按随机数字表法分为低氧组和常氧组，每组16只。

    1.2 试剂与仪器 线粒体分离试剂盒购自pierce公司，BCA蛋白浓度测定试剂盒购自碧云天，小鼠CytC ELISA法检测试剂盒、纯化线粒体冻存液和GENMED纯化线粒体膜通道孔比色法检测试剂盒购于上海杰美基因医药科技有限公司，超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、谷胱甘肽(GSH)测试盒、微量丙二醛(MDA)测定试剂盒均购自南京建成科技有限公司，连二亚硫酸钠(Na2S2O4)为国产分析纯；TECNAI10透射电子显微镜(PHILIPS公司)，ALLEGRA-64R台式高速冷冻离心机(美国BECKMAN公司)，荧光分光光度计，MD连续波长酶标仪(美国)，AVL-COMPACT3型血气分析仪(瑞士AVL公司)。

    1.3 小鼠骨骼肌离体线粒体低氧模型的建立 提取线粒体后，低氧组将0.5 mL的线粒体悬液加入2 mL的密闭容器中，保持37 ℃并向内通入100%氮气及氧清除剂Na2S2O40.5 mmol·L-1致PO2测不出来，保持30 min。常氧组：线粒体悬液置于空气中，其他条件同低氧组 ......