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编号:1429563
骨髓间充质干细胞移植增强大鼠子宫切口再生修复
http://www.100md.com 2014年8月8日 温州医科大学学报 2014年第8期
组织化学,肌层,瘢痕,1材料和方法,2结果,3讨论
     陈志文,杨孝军,张乾,朱华,胡燕

    子宫创伤及后续妊娠时的瘢痕子宫破裂,是妇产科医师仍待解决的一个难题。有效减少子宫切口的瘢痕愈合,增强局部肌细胞再生修复,恢复宫壁肌层的生物力学功能,可能是预防瘢痕子宫破裂的关键,而目前尚缺乏能增强子宫切口再生修复的有效方法。本研究拟在大鼠的子宫创伤模型中,运用骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)进行移植,观察移植后MSCs在子宫切口内,朝向肌层的定向分化情况及局部肌层的生物力学,以探讨MSCs移植增强大鼠子宫创伤后再生修复的可行性。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物、试剂及仪器 SPF级SD大鼠90只(其中60只雌鼠),体质量250~300 g,周龄6~8周,购自温州医科大学实验动物中心(动物实验合格证号:SCXK-20020001)。本研究已获温州医科大学实验动物伦理道德委员会的批准。

    兔抗大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)多克隆抗体,兔抗大鼠α-SMA多 克隆抗体,小鼠抗大鼠GFP单克隆抗体,CY3标记的羊抗兔二抗,相关S-P等免疫组织化学配套试剂盒,均购自武汉博士德生物工程有限公司。荧光显微镜型号TCS-SP2,德国LEICA公司生产。

    1.2 方法

    1.2.1 建立大鼠子宫创伤模型:所有SD大鼠同系自然交配,参照文献[1]建立大鼠瘢痕子宫模型。于妊娠第19天行剖宫取胎术,小心移去仔鼠和胎盘,4-0可吸收薇乔线连续缝合子宫切口,术后2周观察子宫切口的愈合情况,共制作60只子宫创伤雌鼠模型,随机分为移植组与对照组(各30只) ......

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