项振飞，陆妙珍，张欢乐，张三典

    (宁波市医疗中心李惠利医院 放疗科，浙江 宁波 315040)

    ·论 著·

    PLAGL1在结直肠癌中的表观遗传学改变及其机制

    项振飞，陆妙珍，张欢乐，张三典

    (宁波市医疗中心李惠利医院 放疗科，浙江 宁波 315040)

    目的：研究PLAGL1在结直肠癌中的表达及其作用机制。方法：应用半定量反转录PCR(RT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)法检测PLAGL1在结直肠癌细胞系及组织中的表达和甲基化状态。通过MTT增殖实验、克隆形成、细胞周期等实验探讨PLAGL1在结直肠癌中的作用。结果：PLAGL1在结直肠癌细胞系HCT116和DLD1中呈完全甲基化，在SW620、SW480中呈半甲基化，在RKO中为非甲基化状态；PLAGL1在104例结直肠癌组织中的甲基化率为64.4%；PLAGL1甲基化与结直肠癌患者的TNM分期显著相关(P<0.001)，同时PLAGL1甲基化与结直肠癌患者的淋巴结转移显著相关(P<0.001)，而与结直肠癌患者的性别、年龄以及肿瘤分化程度未见显著相关性；PLAGL1的恢复表达可以明显抑制HCT116细胞的增殖(P<0.05)，HCT116细胞的克隆形成数在PLAGL1恢复表达后明显减少；恢复表达PLAGL1后HCT116细胞在G1期的比率明显增加。结论：PLAGL1在结直肠癌中的表达受DNA甲基化的调控，恢复表达PLAGL1后可以抑制结肠癌细胞HCT116的增殖，并使HCT116细胞周期阻滞在G1期，PLAGL1在结直肠癌中起到抑癌基因的作用。

    PLAGL1；结直肠肿瘤；DNA甲基化；表观遗传学

    结直肠癌发病率高，预后较差，严重威胁人类健康。越来越多的研究显示，结直肠癌的发生发展与抑癌基因的表观遗传学尤其是DNA甲基化修饰密切相关[1]。发生启动子区甲基化的新功能基因的发现有助于我们了解结直肠癌发生过程中肿瘤抑制通路的分子机制，同时有助于找到结直肠癌的潜在诊断及治疗靶标。PLAGL1基因位于人类染色体6q24.2，该位点在多种肿瘤中频发重排。PLAGL1是母源性印记基因[2-4]。PLAGL1在多种肿瘤中表现出抑癌作用，可通过作用于p53抑制细胞增殖并调节细胞凋亡及细胞周期发挥作用[5-7]。然而PLAGL1在肿瘤发生中充当的角色则取决于所处的细胞环境，PLAGL1在恶性胶质母细胞瘤及横纹肌肉瘤中则充当癌基因角色[8-9]。PLAGL1的表达受启动子区甲基化的调控在多种肿瘤中[10-11]被报道。而PLAGL1在结直肠癌中的表达及调控机制尚不明确 ......