王德选，叶晓华，余灵芳，林洪洲，庄捷秋，杨青，郑雯洁

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 小儿肾内科，浙江 温州 325027)

    WNK3激酶高表达对白介素-1β诱导HEK293细胞凋亡的保护作用

    王德选，叶晓华，余灵芳，林洪洲，庄捷秋，杨青，郑雯洁

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 小儿肾内科，浙江 温州 325027)

    [摘 要]目的：观察WNK3激酶高表达对白介素-1β(IL-1β)诱导人胚肾细胞(HEK293细胞)凋亡的作用。方法：HEK293细胞分为3组：Vector+NS组、Vector+IL-1β组和WNK3+IL-1β组。Vector+NS组、Vector+IL-1β组转染对照Vector，WNK3+IL-1β组转染WNK3。药物干预时，Vector+NS组加入等量0.9%氯化钠溶液，Vector+IL-1β组、WNK3+IL-1β组加入10 ng/mL IL-1β。分别于培养0、12、24、36和48 h时，采用CCK-8试剂盒检测细胞活性。孵育0、18、36 h时应用Western blot法检测Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleaved Caspase-9等凋亡蛋白。在IL-1β干预0、30、60 min时采用Western blot法检测JNK通路蛋白。结果：Vector+IL-1β组在给药后细胞活性逐渐下降，在48 h达到最低值，WNK3+IL-1β组下降幅度较缓和，与同时间点Vector+IL-1β组比较细胞活性回升，在48 h时差异有统计学意义(P<0.01)。IL-1β孵育后cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达量增加。与36 h的Vector+IL-1β组比较，WNK3+IL-1β组的cleaved Caspase-3显著减少，2组的cleaved Caspase-9在18 h及36 h时差异亦存在统计学意义(P<0.05)。WNK3转染后p-JNK的表达水平较未转染WNK3组的上升幅度降低(P<0.05)。结论：IL-1β诱导HEK293细胞活性下降，而转染WNK3质粒可以有效逆转部分细胞活性。WNK3激酶通过减少JNK的磷酸化抑制Caspase途径的活化，减少细胞凋亡，起到在不利条件下保护肾脏细胞的作用。

    [关键词]WNK3；JNK；白介素-1β；肾脏；凋亡

    肾脏是维持水和电解质平衡的重要脏器，但也极易受到缺血低氧、药物等各种因素的影响，进而引起肾脏不同细胞的功能受损 ......