黄崇杰，刘长宝，胡万乐，蔡锚

    (温州医科大学附属第二医院 肛肠外科，浙江 温州 325027)

    论 著?

    靶向热休克蛋白-27基因沉默对5-氟尿嘧啶诱导SW480细胞凋亡的影响及机制

    黄崇杰，刘长宝，胡万乐，蔡锚

    (温州医科大学附属第二医院 肛肠外科，浙江 温州 325027)

    目的：通过RNA干扰抑制热休克蛋白-27(HSP27)基因的表达，探讨沉默该基因对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导大肠癌SW480细胞凋亡的影响及机制。方法：将细胞分为正常对照组(Normal组)、阴性siRNA转染组(NC组)、HSP27-siRNA转染组(siRNA组)、单纯5-FU组(5-FU组)、5-FU+阴性siRNA转染组(NC+5-FU组)、5-FU+HSP27-siRNA转染组(siRNA+5-FU组)，通过脂质体LipofectamineTM2000将HSP27-siRNA导入SW480细胞，CCK-8法检测靶向HSP27的siRNA和5-FU对SW480细胞增殖的抑制作用，流式细胞技术观察转染后细胞在5-FU作用下的早期凋亡情况，Western blot方法检测凋亡相关蛋白Active-casepase-3、Active-caspase-9及细胞色素C(Cytc)的表达。结果：CCK-8法检测结果显示siRNA+5-FU组细胞增殖抑制率明显高于同期siRNA组和5-FU组，表明联合应用抑制率明显升高(P<0.05)。流式细胞仪检测结果表明siRNA组和5-FU组均可诱导SW480细胞凋亡，两者联合应用细胞早期凋亡率明显升高，与Normal组及NC组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)；Western blot检测结果显示siRNA+5-FU组Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白相对表达水平均高于siRNA组和5-FU组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：靶向HSP27-siRNA能有效抑制大肠癌SW480细胞HSP27蛋白的表达，上调Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白的表达，增强5-FU诱导SW480细胞凋亡，逆转肿瘤细胞对5-FU的耐药。

    结直肠肿瘤；热休克蛋白-27；RNA干扰；5-氟尿嘧啶；细胞凋亡

    近年来，大肠癌发病率和病死率不断攀升，已经严重威胁了人类的健康。对于中晚期患者，指南上推荐以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)为基础的辅助化疗可提高部分患者的生存期 ......