祝立和，胡卢丰，季剑乐，朱暐

    (1.温州市中西医结合医院 病理科，浙江 温州 325000；2.温州医科大学附属第一医院 药剂科，浙江温州 325015)

    乳腺癌干细胞是乳腺癌组织中的一小部分具有无限增殖、自我更新能力的乳腺癌细胞，是乳腺癌形成、复发转移、抵抗放化疗的根源[1]。根据不同的干细胞标记物可以分选出不同的乳腺癌干细胞亚群，神经节苷脂GD2阳性(ganlioside GD2+，GD2+)乳腺癌干细胞亚群被认为具有迄今最强大的致瘤能力[2]，但调节GD2+乳腺癌干细胞的分子机制尚不清楚。最近研究显示GD2+乳腺癌干细胞在不同分子分型乳腺癌细胞系中以基底样乳腺癌细胞系中含量最高[2]，而信号传导与转录激活因子3(signal transduction and activators of transcription 3，STAT3)信号激活被认为是基底样乳腺癌的重要特征[3]，故我们推测STAT3在调节GD2+乳腺癌干细胞增殖、自我更新中发挥重要作用。

    本研究从基底样乳腺癌细胞株MDA-MB-231分选GD2+乳腺癌干细胞并进行鉴定，检测STAT3在GD2+乳腺癌干细胞中的表达，通过研究小分子药物Stattic选择性抑制STAT3与GD2+乳腺癌干细胞自我更新能力的相关性，探讨靶向STAT3在治疗乳腺癌中的意义。

    1 材料和方法

    1.1 材料 人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞株由温州医科大学附属第一医院中心实验室保存；DMEM/F12(1∶1)培养基购自美国Hyclone公司；胎牛血清(FBS)、B27添加剂购自美国Gibco公司；人表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)、人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)购自美国Sigma公司；CCK-8试剂盒购自日本同仁公司；GD2抗体购自美国Abcam公司，STAT3、pSAT3抗体购自美国CST公司，STAT3抑制剂Stattic购自美国MCE公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养：人乳腺癌MDA-MB-231细胞培养在37 ℃、5%的CO2培养箱中，10% FBS的DMEM培养基培养，每3 d换液1次。GD2+乳腺癌干细胞培养在无血清培养液中，培养基由DMEM/F12(1∶1)、B27(2%)、EGF(20 ng/mL)、bFGF(20 ng/mL)组成。置于37 ℃、含5% CO2的环境下培养。

    1.2.2 干细胞分选：选取对数生长期MDA-MB-231细胞 ......