杨颖，刘国，刘传通，金琼，朱飞

    (温州医科大学 口腔医学院，浙江 温州 325027)

    目前，临床中用于解决颌面部缺损骨重建的方法是使用自体骨、同种异体骨或异种骨等骨替代物诱导新骨生成，但这几种材料有其各自的不足。如作为骨替代材料“金标准”的自体骨在数量及大小上常不能满足缺骨区的要求，还会增加骨供区的病理损害[1]，而同种异体骨和异种骨成骨作用较弱[2-3]，有再吸收及病毒传播的风险[4]，因此有必要寻求一种更好的方法来解决骨量不足的问题。

    富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin，PRF)是第二代血小板浓缩物，富含血小板及各种细胞因子，具有促进组织愈合的能力，同时还含有抗炎因子和修复介质，具有调节炎症反应和抗感染的能力。自体骨髓浓缩物(bone marrow aspirate concentrate，BMAC)是通过对骨髓抽吸物离心、分离后获得的有核细胞的浓缩物，其内富含骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cell，BMSC)、造血干细胞和淋巴细胞，被誉为骨替代材料的“铂金标准”[5]。本研究将PRF与BMAC联合应用于兔颅骨缺损，观察其成骨能力，为其在临床中的应用提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物 12～16月龄健康日本大耳白兔6只，体质量1.5～2.0 kg，雌雄不限，由温州医科大学实验动物中心提供并饲养，动物使用许可证号：SYXK(浙)2014-0006。

    1.2 实验方法

    1.2.1 PRF的制备：采用CHOUKROUN等[6]提出的方法：兔心脏取血5 mL，放入不添加抗凝剂的离心管中，3 000 r/min的速度离心10 min。血液样本分为3层(见图1)，中间层为乳白色的纤维蛋白凝胶(即PRF)，上层和下层分别是贫血小板血浆层和红细胞碎片层，取中间层，无菌纱布挤压后剪成约1 mm×1 mm大小备用，另取一份压成膜片行组织学分析。

    图1 PRF的制取

    1.2.2 BMAC的制备：以含有0.2 mL肝素钠(100 mg/L)的5 mL注射器，于兔双侧股骨处使用16号骨髓穿刺针各抽取骨髓2.5 mL，3 000 r/min离心10 min，可见骨髓分为3层(见图2)，上层为淡黄色浆液层，中间为黄褐色有核细胞层 ......