叶乐乐，张佳丽，陈文静，沈贤，胡畅远，丁宁，薛向阳

    (1.温州医科大学 微生物学与免疫学教研室 分子病毒与免疫研究所，浙江 温州 325035；2.温州医科大学 仁济学院，浙江 温州 325035；3.温州医科大学附属第一医院 胃肠外科，浙江 温州325015；4.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 胃肠外科，浙江 温州 325027)

    UL138基因位于人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)ULb’区，与UL133、UL135及UL136等HCMV基因以多顺反子形式转录，编码的蛋白是一种多功能蛋白[1]。有研究发现，UL138基因是HCMV在人外周血单核细胞及CD34+髓系前体细胞内潜伏感染的建立与维持所必需的基因，其表达抑制单核细胞HCMV增殖，促进病毒潜伏，UL138基因缺失将损害HCMV潜伏状态的维持，为此，UL138被认为是HCMV潜伏相关基因[2-3]。我们前期的研究发现，UL138基因的表达不影响正常胃黏膜细胞的基本生物学特征，但却在胃癌细胞中扮演着抑癌基因的角色，通过封闭热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)，可显著抑制胃癌细胞增殖，促进胃癌细胞凋亡[4]，但UL138对肿瘤细胞免疫相关功能的影响尚不清楚。为此，本研究利用UL138重组质粒转染胃癌细胞BGC-823，通过转录组差异基因分析结合免疫原性细胞死亡相关标志检测，分析UL138基因表达对胃癌细胞免疫相关功能的影响。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 质粒和细胞株：pcDNA3.1-flag/UL138重组质粒由本实验室构建并长期保存于-80 ℃冰箱。胃癌细胞BGC-823购自中国科学院细胞库/干细胞库。

    1.1.2 主要试剂、工具酶和抗体：脂质体LipofectamineTM2000购自美国Life Technology公司；FBS、1640培养基购自美国Gibco公司；Trizol试剂购自美国Invitrogen公司；质粒大量抽提试剂盒购自美国OMEGA公司；RealMaster Mix试剂盒、ReverTra Ace反转录试剂盒购自日本Toyobo公司；细胞因子定量PCR检测试剂购自常州楚天生物科技有限公司；Flag抗体购自美国Sigma公司；FITC标记的羊抗兔抗体购自杭州联科生物技术股份有限公司；GAPDH抗体购自杭州贤至生物科技有限公司；HSP70抗体购自武汉Proteintech公司；ERp57抗体购自美国CST公司。

    1.2 方法 ......