褪黑素对博来霉素诱导肺纤维化小鼠α-SMA和E-cadherin表达的影响
肺泡,1材料和方法,2结果,3讨论
胡青青,周恩敏,金克,杜勇,钱燕,翁华春(温州医科大学附属第一医院 儿科,浙江 温州 325015)
肺纤维化是许多急性和慢性肺病的常见终末期后遗症,是一种进行性肺病[1]。尽管近年来肺纤维化的治疗有所进展,但大多数患者仍然面临病死的结果,目前唯一的治愈性治疗是肺移植[2]。因此,对肺纤维化机制进一步研究并寻找合适的治疗靶点是必要的。褪黑素由松果体等器官合成,广泛分布于生物体内[3]。研究表明,褪黑素具有抗氧化、抗癌以及免疫调节作用[4]。YEUNG等[5]研究表明,褪黑素可以抑制慢性间歇性缺氧诱导的心肌损伤大鼠纤维化标志物的表达,如TGF-β。DAS等[6]报道褪黑素干预可以消除脂毒性介导的肝星状细胞活化并防止肝纤维化进展。但是目前关于褪黑素对肺纤维化的作用尚未见相关报道,本研究旨在探讨褪黑素对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠的影响及其可能机制。
1 材料和方法
1.1 材料 博来霉素粉剂由日本化药株式会社生产,规格15 mg/支,温州医科大学附属第一医院药剂科提供;褪黑素购自美国Sigma公司;氧化应激试剂盒购自南京建成公司;本实验所使用反转录及RT-PCR相关试剂均购自大连TaKaRa公司;RNA提取试剂TRIzol购自美国Invitrogen公司;α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)引物由深圳华大基因公司合成;单克隆抗小鼠E-cadherin抗体、单克隆抗小鼠α-SMA抗体购自美国Cell Signaling Technology公司;HRP标记的兔抗小鼠IgG购自上海碧云天生物公司;免疫组织化学试剂盒、DAB显色试剂盒购自美国Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 造模及分组:雄性SPF级C57BL/6小鼠30只,6周龄,20 g左右,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,动物许可证号:SCXK(沪)2017-0005。用博来霉素(5.0 mg/kg)气管内注射制作大鼠肺纤维化模型[7]。随机分为模型组和褪黑素组,每组15只。褪黑素组腹腔注射5.0 mg/kg褪黑素 ......
您现在查看是摘要页,全文长 8216 字符。