张明晓，黄陆平，金深辉，陈思佳，戴勤学

    (温州医科大学附属第一医院 麻醉科，浙江 温州 325015)

    高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1，HMGB1)为晚期炎症反应介质，由单核细胞或巨噬细胞在炎症反应中主动分泌[1-2]。丙泊酚作为一种新型静脉麻醉药，因其起效快、苏醒迅速而完全、不良反应少、持续输注后无蓄积等特点，己广泛应用于临床各科的手术麻醉[3-4]。近年来报道丙泊酚具有脑保护作用，而炎症是脑损伤中的关键因素[5-6]。越来越多的研究已证实丙泊酚的炎症调控作用[5，7-8]，但其对HMGB1的调控作用尚未完全阐明。p38 MAPK信号通路是细胞内应激反应信号，其表达广泛，与炎症反应密切相关[9-10]。已有研究证实，丙泊酚能通过抑制HMGB1的表达调控LPS诱导的炎症反应，缓解大鼠急性肺损伤[1]。p38信号通路也可调控TNF-α诱导的HMGB1表达[11]。我们推测丙泊酚能通过p38 MAPK信号通路抑制TNF-α诱导的HMGB1表达，本研究应用TNF-α诱导小胶质细胞炎症反应模型，验证丙泊酚对HMGB1的调控作用及机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 小胶质BV-2细胞(中国科学院基础医学细胞中心)。丙泊酚、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)购自美国Sigma公司；HRP标记山羊抗兔IgG/鼠IgG、p-p38鼠单克隆抗体、p38鼠多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司；抗GAPDH兔单克隆抗体购自德国CST公司；HMGB1鼠单克隆抗体购自英国Abcam公司；RNA提取试剂购自大连Takara公司；反转录试剂盒、实时定量PCR试剂盒购自美国Invitrogen公司。蛋白电泳、转膜与曝光系统购自美国Bio-rad公司；SpectraMax M2型酶标仪购自美国Molecular Devices公司；倒置及正置荧光显微镜购自日本Nikon公司。

    1.2 方法

    1.2.1 小胶质BV-2细胞培养：将小胶质BV-2细胞接种到DMEM高糖培养基(含100 U/mL链霉素、100 U/mL青霉素和10%胎牛血清)中培养传代2次取生长良好的细胞用于实验研究 ......