季恩成，周也立，陈成帷，陈春，李井，高伟阳，潘哲尔

    (1.温州医科大学附属第一医院 骨科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 手外科，浙江 温州 325027)

    骨关节炎是以软骨的退变、软骨下骨硬化和滑膜炎症为特征的全球性疾病，并且最终诱发关节功能障碍[1]。如何有效延缓骨关节炎的进展，已成为该领域的一项亟待解决的难题。因此，很有必要探索一种有效的治疗骨关节炎的方法。法舒地尔是一种Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(Rho associated coiledcoil forming protein kinase，ROCK)的新型抑制剂，最初被用于蛛网膜下腔出血患者，以缓解血管痉挛并改善其预后[2]。大量研究报道了其更为广泛的效应，例如抑制MAPK通路激活的作用[3]。虽然既往研究表明法舒地尔能有效对抗骨关节炎发生的疼痛，但关于法舒地尔在该领域的应用或分子机制的研究却很少。因此，本研究旨在观察法舒地尔对IL-1β诱导的大鼠软骨细胞外基质(extracellular matrix，ECM)降解的影响，并探讨其可能的作用机制，为骨关节炎的治疗提供新的思路。

    1 材料和方法

    1.1 材料 由温州医科大学实验动物中心提供的清洁级1周龄雄性SD大鼠，动物使用许可证号：SYXK(浙)2015-0009。法舒地尔购于大连美仑公司；4’，6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)购于北京索来宝公司；重组IL-1β购于美国PeproTech公司；细胞计数试剂盒-8(CCK-8)购于日本Dojindo公司；COX-2、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38/p38和GAPDH抗体购于美国PeproTech公司；iNOS抗体购于美国Cell Signaling Technology公司；山羊抗兔IgG-HRP、山羊抗小鼠IgG-HRP、Alexa Fluor 488标记的山羊抗兔IgG(H+L)二抗和RIPA裂解缓冲液购于上海碧云天生物技术有限公司；One Step TB Green Prime-Script RT-PCR Kit II购于美国Perfect Real Time公司；RNAiso Plus购于日本TaKaRa公司；F12/DMEM 培养基购于美国Gibco公司；前列腺素E2(PGE2)测定试剂盒和一氧化氮(NO)测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所 ......