吴其隆，蔡锦华，徐荷林，李慧，赵应征，陈斌

    (1.温州医科大学附属第一医院 超声科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学 药学院，浙江 温州325035)

    多西他赛(docetaxel，DTX)是由欧洲浆果紫杉的针叶中提取的化合物半合成的紫杉醇衍生物。其作用机制是通过促进微管双聚体装配成微管，并且防止去多聚化过程而使微管稳定，阻滞细胞于G2和M期，抑制细胞的进一步分裂，从而抑制癌细胞的有丝分裂和增殖[1-2]。其对于乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、胃癌、胰腺癌、软组织肉瘤均具有一定疗效[3]。然而DTX存在水溶性差、脂溶性不强、体内循环时间短以及耐药性等缺点，限制了其在临床上的广泛应用。目前临床上使用的DTX注射液是添加了非离子表面活性剂，如乙醇和聚山梨酯80(吐温80)，而这些表面活性剂容易导致骨髓抑制、过敏反应、神经毒性以及溶血等不良反应[4-5]。为了克服以上不足，已有报道将DTX制成脂质体、纳米粒、水凝胶、聚合物胶束等用于疾病的诊断和治疗[6-9]。本研究以泊洛沙姆188(PL-188)为纳米材料，因其在结构上是一种三嵌段的聚氧乙烯和聚氧丙烯共聚物(PEO-PPO-PEO)，以中间的PO链为疏水嵌段，两端的EO链为亲水嵌段，该聚合物能自发组成纳米胶束。同时，已有报道证实泊洛沙姆可以逆转多种类型肿瘤的耐药性，使一线化疗药物对耐药肿瘤细胞的毒性增加2-3倍[10-11]。环状c(RGDyk)短肽作为细胞整合素及其配体相互作用的识别位点，能与C6脑胶质瘤细胞以及人脑胶质瘤U87耐药细胞上过表达的整合素αvβ3特异性结合[12-13]，提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤毒性。本实验以PL-188为原材料制备羧基化PL-188，将c(RGDyk)与其键合，构建c(RGDyk)-PL-188靶向新材料。探索c(RGDyk)-PL-188自组装形成胶束的能力以及其对DTX的包载性能，评价其对耐药的人脑胶质瘤U87细胞的靶向性与抗肿瘤效果。

    1 材料和仪器

    1.1 材料 DTX购自上海龙翔生物医药开发有限公司；N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)购自上海阿拉丁公司；2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2，4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐(CCK8)购自日本株式会社同仁化学研究所；c(RGDyk)环状短肽购自上海吉尔生化有限公司；C6细胞购自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所；耐DTX的人脑胶质瘤U87细胞购自北京NTCC典型培养物保藏中心；DMEM培养基、RPMI1640培养液、胰酶、胎牛血清购自美国Gibco公司；PL-188、DAPI试剂盒购自美国Sigma公司 ......