潘达，胡飞虹，金灿，闻浩，孟伟阳，朱烈烈，陈大庆

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院，浙江 温州 325027；1.急诊医学科；2.脊柱外科)

    内皮细胞(endothelial cell，EC)在调节血管功能、生理和病理生理过程中起着至关重要的作用。氧化应激诱导血管内皮细胞损伤是诱发脑卒中、动脉粥样硬化、高血压和糖尿病等心血管疾病的一个重要因素[1-2]。因此，寻找能够对抗活性氧引起的氧化应激和细胞凋亡、可治疗动脉粥样硬化的自由基清除剂具有重要临床意义。芍药醇(paeonol，PAE)是一种从中药中分离出来的活性化合物，如牡丹皮、芍药和日本薯。PAE既可用作食品添加剂又可用作传统的东方药物[3-5]，用于治疗各种疾病，包括炎性疾病和动脉粥样硬化[6]。PAE生物学和药理学活性广泛，研究显示其具有抗动脉粥样硬化、抗炎、抗氧化活性，抗糖尿病作用和抗肿瘤作用[3，6-7]。然而，目前还尚不清楚PAE是否可以预防叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide，TBHP)诱导的内皮细胞凋亡以及与其发生相互作用的细胞内因子。本研究拟探讨PAE对TBHP损伤的血管内皮细胞的保护作用及其机制，为PAE防治心血管疾病提供参考依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料 人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)购于美国ATCC，并以含10%胎牛血清的1640培养基培养。PAE购于美国Sigma公司，二甲基亚砜(DMSO)购于美国Sigma公司，4 ℃储存。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。CCK8购于日本同仁公司。Transwell小室购于美国康宁公司。兔抗人Cleaved-caspase 3多克隆抗体以及AlexaFluor 555驴抗兔二抗均购于美国Abcam公司。荧光倒置生物显微镜购于美国莱卡公司；Bio-Rad 550酶标仪购于美国Bio-Rad公司。

    1.2 方法

    1.2.1 分组：体外培养HUVECs分为对照组(Control组)、造模组(TBHP组)和PAE处理组(各浓度PAE+TBHP组)。

    1.2.2 细胞培养、处理：HUVECs使用含10% FBS的1640完全培养基培养 ......