徐建飞，汪洋，胡旭军，王婳，许兆军

    (中国科学院大学宁波华美医院 重症医学科，浙江 宁波 315010)

    由天然活性产物衍生的新型抗炎药的发现引起了医药化学家的广泛关注。土木香内酯(alantolactone，ALA)是从土木香根茎中提取的，在古代被用作中草药。它是萜类不饱和化合物中最重要的一类，被认为是治疗神经损伤、癌症和胰岛素抵抗等多种疾病的候选药物[1-3]。最近的研究表明，ALA具有多种抗炎和抗肿瘤药理活性[4-5]。另外，在大鼠外伤性脑损伤中，ALA表现出神经保护的作用[3]。不仅如此，ALA可保护Aβ25-35诱导的小鼠皮质神经元细胞的凋亡，并逆转了东莨菪碱诱导的小鼠认知障碍，进一步的研究表明活性氧簇参与其中[6]。但是ALA对过度氧化应激诱导神经细胞凋亡的具体作用及其机制仍不清晰。为探讨ALA抗神经细胞凋亡的作用，我们以神经细胞PC12 为对象，观察其对H2O2引起的神经细胞PC12凋亡的抑制作用并初步探讨机制，为临床应用提供理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料 PC12细胞购自中国科学院基础医学细胞中心。ALA购自上海陶素生化科技有限公司；H2O2购自美国Sigma公司；HRP标记山羊抗体兔IgG/鼠IgG购自美国Santa Cruz公司；抗GAPDH兔单克隆抗体、AMPK鼠单克隆抗体、p-AMPK鼠单克隆抗体、STAT1兔多克隆抗体和p-STAT1兔单克隆抗体购自美国CST公司；蛋白电泳、转膜与曝光系统购自美国Bio-rad公司。

    1.2 方法

    1.2.1 神经细胞PC12 培养：将PC12 细胞接种到DMEM高糖培养基(含100 μ/mL链霉素、100 μ/mL青霉素和10%胎牛血清)中培养，每48 h换液1次，2～3 d传代1次，传代2次取生长良好的细胞用于实验研究。

    1.2.2 MTT法检测细胞增殖情况：分别取对数生长期PC12细胞接种于96孔板中 ......