金丝桃素介导的光动力学疗法对K562细胞活性与自噬的影响
培养液,白血病,1材料和方法,2结果,3讨论
王德选,王万铁,郑绿珍,陈伟伟,杨青,庄捷秋,许益笑,(1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院小儿肾内科,浙江温州325027;2.温州医科大学基础医学院病理生理教研室,浙江温州325035)
我国白血病年发病率为3~4/10万,且呈逐年增加趋势[1]。目前白血病治疗方式主要有化疗、药物靶向治疗、骨髓和干细胞移植等,取得了一定的治愈和缓解效果,但存在不同程度的化疗药物耐药及不良反应、移植配型困难、费用高昂等缺点。因此,在原有治疗基础上,探索一些安全有效的辅助治疗方法显得极为重要。
金丝桃素(hypericin)是植物贯叶连翘提取物的主要活性成分之一,临床上已作为抗病毒、抗抑郁药物应用多年,具有很高的药物安全性[2-3]。另外金丝桃素作为一种天然光敏剂,还具有低光照下毒性低和光依赖性抗肿瘤活性强的双重特点,可对较多实体肿瘤实施光动力学治疗作用[4]。金丝桃素容易被白细胞等有核血液细胞摄取,但封闭血管系统中流动的各种血细胞都无法直接照射,也限制了金丝桃素介导的光动力学疗法(hypericinmediated photodynamic therapy,Hyp-PDT)在血液系统疾病的应用。本课题组研制了倒置可调功率光动力学照射平台,通过体外循环实施Hyp-PDT(另文发表)并研究其相关机制。本研究主要探索Hyp-PDT对体外培养的K562细胞株的杀伤作用及对自噬通路的影响,希望为Hyp-PDT引入外周血白血病的治疗提供理论验证,改善白血病患者的健康。
1 材料和方法
1.1 材料 K562 细胞株购自上海生科院细胞资源中心;高纯度金丝桃素购自美国Sigma公司。CCK-8分析试剂盒购于日本Dojindo Laboratories;Beclin-1、LC3 及Akt兔多克隆抗体购自美国Cell Signal Technology公司;二抗为美国Jackson ImmunoResearch公司产品;培养基RPMI1640购自美国Gibco公司;胎牛血清购自杭州四季青公司 ......
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