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编号:1428239
Linc01635对川崎病血管内皮细胞凋亡的影响
http://www.100md.com 2020年7月17日 温州医科大学学报 2020年第7期
血浆,诱导,1材料和方法,2结果,3讨论
     陈瑞瑶,荣星,吴婷婷,贾尝,吴蓉洲,褚茂平,张春祥

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院,浙江 温州 325027,1.儿童心脏中心;2.儿科研究所)

    川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种以全身性血管炎为主要病变的急性自限性疾病,病因不明,冠状动脉瘤是最严重的并发症[1-2]。既往研究表明内皮细胞损伤是KD发生发展的重要病理机制,但具体机制仍然不清楚[3-5]。长链非编码RNAs(lncRNAs)是一类长度大于200 nt的RNA,具有强大的生物学功能[6-9]。目前尚未见关于KD血浆对血管内皮细胞中lncRNAs表达的影响和lncRNAs在KD诱导的血管内皮损伤中的潜在作用的报道。Linc01635(ENST00000455966.1,chr1:22023994-22024968)是基因间lncRNA,长度为615 bp。Linc01635在内皮细胞中的生物学功能目前尚不清楚。我们的初步实验发现,与对照组相比,KD患者血浆培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中linc01635表达明显降低。HUVECs中的linc01635在KD血浆培养下表达量降低可能与细胞损伤有关,本研究探讨linc01635在KD诱导的内皮细胞凋亡中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 细胞株和主要试剂 HUVECs购自江阴齐氏生物科技有限公司;TRIzol试剂和Lipofectamine 3000购于美国Invitrogen公司;胎牛血清和高糖DMEM培养基购于美国Gibco公司;引物、siRNA和FISH试剂盒购于广州锐博公司;Annexin V PE流式试剂盒购于美国Becton Dickinson公司;PrimeScriptTMRT Master Mix购于日本TaKaRa公司;SYBR Green和96孔板购于美国BIORAD公司;慢病毒购于上海汉恒生物科技公司;4%多聚甲醛、无水乙醇和异丙醇购于上海化学试剂总厂 ......

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