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编号:1428183
环状RNA-42398在肝纤维化模型中的表达变化及功能
http://www.100md.com 2020年11月3日 温州医科大学学报 2020年第10期
结果显示,活化,1材料和方法,2结果,3讨论
     吕雪幼,周玉平,杨萍,朱林文

    (1.宁波大学医学院附属医院 消化内科,浙江 宁波 315020;2.宁波大学 消化疾病研究所,浙江 宁波 315020;3.宁波卫生职业技术学院 护理学院,浙江 宁波 315100;4.宁波大学医学院 生物化学与分子生物学系,浙江 宁波 315211)

    环状RNA(circular RNA,circRNA)是非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)研究领域的最新热点之一,在阐明疾病发病机制及相关的诊断标志物及治疗靶点发现方面,取得了重大进展[1]。研究发现circRNA与原发性肝癌、脂肪肝等多种慢性肝病有关,部分学者也初步探讨了其与肝纤维化的关系[2-3]。 本课题组通过基因芯片技术初步分析了肝纤维化模型小鼠肝脏的circRNA表达谱变化,发现mmu_circ_42398的表达变化差异最大,模型组与正常组表达量相差11.74倍[4]。本研究拟在此基础上,进一步验证mmu_circ_42398在肝纤维化模型肝组织和相关的细胞模型的表达变化,并初步探讨其功能。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物:C57BL/6雄性小鼠,SPF级,体质量18~22 g,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,生产许可证号:SCXK(京)2016-0006,饲养及实验于宁波大学实验动物中心,实验获得宁波大学动物伦理委员会批准同意。AML12细胞株、RAW264.7细胞株购自中国科学院上海细胞库;JS1细胞株购自深圳豪地华拓生物公司。

    1.1.2 主要试剂和仪器:CCl4分析纯及3% H2O2

    购自上海国药集团化学试剂有限公司。胎牛血清、细胞培养基购自美国Gibco公司。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷丙转氨酶 (glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,AST)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)检测试剂盒购自武汉USCN公司。重组TGF-β1细胞因子购自南京金斯瑞生物科技公司。脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)购自北京索莱宝科技有限公司。RNAhold液购自北京全式金生物公司 ......

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