周超群，汤石鹏，钱亮亮，甄政安，程如梅

    温州医科大学 眼视光学院(生物医学工程学院) 纳米生物材料研究所，浙江 温州 325027

    正确的蛋白折叠形态是维持细胞与组织稳定生化过程的基础[1]。基因突变、应激以及不良的翻译后修饰常常导致蛋白错误折叠[2]。错误折叠蛋白的堆积易引发一系列疾病，例如阿尔茨海默病、亨廷顿病、白内障等[3]。最近，科学家尝试利用自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)作为靶标，设计引导型药物分子，识别并诱导致病的错误折叠蛋白定位到自噬体膜上，利用自噬降解相关致病蛋白，保留结构相近的功能性蛋白，达到治疗目的，取得了理想的结果[4]。

    本研究将氧蒽酮与腺苷-3’，5’-环磷酸反应，得到腺苷-3’，5’-环磷酸-氧蒽酮希夫碱(S1)，研究其与自噬标志物LC3B的作用，得到二者的结合模式和稳定常数，从分子水平上揭示如何通过LC3B的作用来开发诱导自噬的潜在药物。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂 氧蒽酮、腺苷-3’，5’-环磷酸、三乙胺、磷酸系PBS缓冲溶液、乙醇，均由国药集团上海试剂公司提供。重组人LC3B蛋白(ab103506)购自艾博抗(上海)贸易有限公司。LC3B溶液使用时新鲜配制。所有溶液均用去离子水配制。

    1.2 实验仪器 紫外可见分光光度计(Lamda 35，美国Perkin Elmer公司)，荧光光谱仪(AB-series 2 luminescence spectrometer，日本Hitachi High-Technologies公司)，元素分析仪(Vario EL III型，德国Elmentar公司)。

    1.3 S1的合成 将0.1961 g(1 mmol)氧蒽酮溶解于20 mL无水乙醇中，加入0.3292 g(1 mmol)腺苷-3’，5’-环磷酸和0.3 mL冰醋酸 ......