王成德，许允求，苏志鹏

    温州医科大学附属第一医院 神经外科，浙江 温州 325015

    神经胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤，占颅内肿瘤的60%左右，具有高发病率、低治愈率、高病死率等特点[1-3]。此外，胶质瘤还具有高侵袭性、高复发率的特点，传统的治疗手段有手术、放疗和化疗，但目前患者的平均生存时间仅14.6个月[4-5]。目前临床尚无有效治疗方法，患者5年生存率仍然低于5%[6]。木香内酯(micheliolide, MCL)是从缅桂花中分离得到的倍半萜内酯[7]。既往研究表明MCL可通过PI3K/Akt、NF-κB和MAPK等多种信号通道[7-9]在癌症治疗、炎症、免疫调节性急性骨髓性白血病和肾纤维化中均发挥作用。研究发现MCL对胶质瘤细胞生长也具有明显抑制作用[10]。但是，MCL在水溶液中溶解性较低，限制了它的临床应用[11]。目前，多种纳米材料被开发为药物载体，以封装药物分子，并靶向地将其递送到病变部位，以提高药物疗效，减少药物不良反应[12]。本研究将纳米材料DSPE-PEG作为药物载体携带MCL，研究其对U87和U251胶质瘤细胞的杀伤作用，为临床胶质瘤治疗提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 主要仪器 旋转蒸发仪(N-1300V-WB，上海巴玖公司)；透射电子显微镜(TEM Tecnai F20，美国FEI公司)；加热磁力搅拌器(DF-101S，郑州佰泽仪器有限公司)；激光粒度分析仪(S3500，美国麦奇克有限公司)；高效液相色谱仪(Agilent 1100，美国安捷伦公司)；冷冻高速离心机(美国Thermo scientific公司)；酶标仪(美国Beckman公司)；荧光光学显微镜(日本Olympus公司)；倒置普通显微镜(日本Olympus公司)；SDS-PAGE电泳仪(美国Bio-rad公司)。

    1.2 细胞和试剂 U87和U251 胶质瘤细胞均由温州医科大学附属第一医院中心实验室提供；MCL由南开大学药学院提供；DMEM培养基、胎牛血清、25%胰酶购自美国Gibco公司；Caspase3、Caspase8、Bcl-2购自美国Abcam公司；蛋白质印迹(Western blot)检测试剂盒、抗体稀释液、CCK-8试剂盒购自北京索莱宝公司。

    1.3 方法

    1.3.1 薄膜水化法制备MCL@DSPE-PEG：精密称取5 mg MCL、20 mg聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)、10 mg二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)和10 mg卵磷脂(lecithin)放入50 mL的圆底烧瓶中 ......