岩藻糖基转移酶II对前列腺癌细胞生物学功能的影响及机制
糖基化,小室,细胞株,1材料和方法,2结果,3讨论
王若妍,胡铭倩,瞿闻馨,范赛荣温州医科大学 检验医学院(生命科学学院),浙江 温州 325035
前列腺癌的发病率在男性所有恶性肿瘤中高居第二,2020年全球约有141多万人新患前列腺癌,约有37.5万人因前列腺癌而丧生[1-2]。据我国2020年对前列腺癌的专项统计发现,2017年我国男性前列腺癌新增患者数、死亡人数、发病率及病死率均大幅增加[3]。肿瘤的发生发展过程中往往伴随着异常的糖基化修饰,直接影响着肿瘤细胞的生长、黏附、转移、规避免疫监视等[4-6],已逐渐被认为是肿瘤的又一新特征[7]。岩藻糖基化是与癌症最密切相关的糖基化修饰之一,由岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase, FUT)催化介导[8-9]。研究表明,FUT在多种肿瘤中存在异常表达,如乳腺癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌等,且与肿瘤的分期、预后等具有一定的相关性[10-11]。研究表明FUT2在肺腺癌中异常表达,且参与了肺腺癌细胞生物学功能的调控[12],但FUT2与前列腺癌的相关性未见相关报道。为此我们以FUT2为研究对象,探讨FUT2对前列腺癌生物学功能的影响,为前列腺癌的早期诊断及分子靶向治疗提供潜在的靶标和理论依据。
1 材料和方法
1.1 材料 临床前列腺癌组织芯片购自西安百思达生物科技有限公司。前列腺癌PC-3细胞株购自上海细胞生物所。FUT2低表达载体psi-U6.1/eGFP/Puro-FUT2、空载载体psi-U6.1/eGFP/Puro-NC均由上海吉玛制药技术有限公司构建;胎牛血清FBS购自美国Hyclone公司;DMEM培养基、F-12培养基、PBS均购自美国Gibco公司;β-catenin抗体购自美国Santa Cruz公司;ICAM-1抗体、Cyclin D1抗体、FUT2抗体、β-actin抗体、Tubulin抗体、GAPDH抗体购自美国Abcam公司。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学实验:将组织芯片烤至石蜡融化后脱蜡、复水、洗涤 ......
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