邵晓晓，王伟中，马国龙，金颖莉，史睿昕，蒋益

    1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 消化内科，浙江 温州 325027；2.温州医科大学 第二临床医学院，浙江 温州 325035

    溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)确切病因未知[1]，临床上缺乏特异性、有效的治疗药物。UC患者病情常迁延反复，因此寻找安全有效的治疗药物迫在眉睫。研究证实核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在UC患者体内呈过度活化状态，参与UC的发生和发展[2]。Toll样受体4(Tolllike receptor 4,TLR4)通过外来刺激因子和TLR4结合之后激活固有免疫系统，启动NF-κB信号通路，导致炎症反应发生[3]。

    黄芩素(分子式C15H10O5)是中药黄芩的主要有效成分，具有抗炎、抗菌、免疫调节等作用[4]。《伤寒论》认为以黄芩为主药的黄芩汤有清热燥湿、和中止痛的作用，近年来研究发现，黄芩汤对治疗炎症性肠病具有较好疗效，但机制不明[5]。研究还发现黄芩素能够通过调节NF-κB的活性达到抗炎效果[6]。因此，本研究通过观察黄芩素对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠的治疗作用，研究黄芩素是否通过干预TLR4/NF-κB信号通路发挥作用，旨在为黄芩素治疗UC提供实验和理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂：黄芩素购自上海Aladdin公司，DSS(相对分子质量36～50 kDa)购自美国MP Biomedicals公司，羟甲基纤维素钠、苏木素-伊红(HE)染色试剂盒、二脒基苯基吲哚(DAPI)染料购自北京Solarbio公司，RNAsimple总RNA提取试剂盒购自美国Invitrogen公司，PrimeScript反转录试剂盒购自美国Roche公司，iTaqTMUniversal SYBR?Green Supermix购自美国Bio-Rad公司。山羊抗小鼠NF-κB p65抗体购自上海Rndsystems公司、兔抗小鼠EPCAm抗体购自美国Affinity公司，驴抗山羊(Alexa Fluor488标记)荧光二抗购自英国Abcam公司，驴抗兔(Cy3标记)荧光二抗购自武汉Servicebio公司。

    1.1.2 动物：6～8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠，体质量18～22(21.7±0.16)g，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司，并在温州医科大学SPF级实验动物中心适应性饲养1周后用于实验 ......