叶凯丽，黄诗琴，胡婷，赵艳玲

    温州医科大学附属第二医院 肾内科，浙江 温州 325027

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病最常见的死亡原因及常见的微血管并发症，目前普遍认为慢性炎症、氧化应激、糖脂代谢紊乱是DN进展的最主要因素[1-2]。研究表明[3-4]DN小鼠与正常小鼠相比肠道菌群结构存在显著差异，并出现不同程度的能量代谢异常，YANG等[5]认为肠道微生物代谢物可作为一种特殊的信号分子通过肠道屏 障-肠黏膜进入血液循环而影响机体重要器官的功能，包括心、脑、肾等器官，其中短链脂肪酸尤为重要。丁酸盐是一种重要短链脂肪酸，它可通过肠道屏障进入血液循环影响肠外器官的功能，如调控胰岛素敏感性、抗炎、抗氧化等[6-7]。目前，越来越多的研究表明肠道菌群可以通过其代谢产物影响肾脏疾病的发生发展。本研究以db/db小鼠为研究对象，从GLP-1R/AMPK途径来探讨肠道菌群代谢物丁酸盐对2型DN小鼠肾脏的保护作用及其机制。

    1 材料和方法

    1.1 主要仪器及试剂 罗氏血糖仪购自德国Roche Diagnostics GmbH公司，丁酸钠购自上海Macklin公司(CAS号：156-54-7)，苏木精-伊红(HE)染色试剂盒、过碘酸-希夫(PAS)染色试剂盒均购自北京索莱宝生物科技有限公司，尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、血肌酐(serum creatinine, SCr)、甘油三酯(triglyceride, TG)、血清总胆固醇(total cholesterol, TC)试剂盒购自南京建成生物工程研究所，白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)酶联免疫吸附检测试剂盒购自江苏酶免实业有限公司；尿微量白蛋白、尿肌酐酶联免疫吸附检测试剂盒购自上海抚生实业有限公司。Phospho-AMPKα(Thr172)Rabbit mAb(#2535)、AMPKα Rabbit mAb(#5831)抗体购自美国Cell Signaling Technology公司；胰高血糖素样肽(glucagon-like peptide-1, GLP-1)受体(GLP-1R)抗体(ab218532)购自英国Abcam公司。

    1.2 实验动物 24只13周龄SPF级雄性db/db小鼠，体质量(45±7)g，10只同周龄雄性db/m小鼠，体质量(27±2)g，均购自常州卡文斯实验动物有限公司，实验动物许可证号：SCXK(苏)2016-0010，动物质量合格证号：202118368 ......