基于Keap1/Nrf2信号通路研究电针对神经病理性疼痛大鼠线粒体自噬的影响
背角,造模,1材料和方法,2结果,3讨论
程博,屠文展,楼新法,杨观虎,蒋松鹤,3,吴巧云,31.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 康复医学中心,浙江 温州 325027;2.温州医科大学中美针灸康复研究所 整合优化医学研究中心,浙江 温州 325035;3.温州市康复重点实验室 浙江省针灸康复重点实验室,浙江 温州 325027
神经病理性疼痛现今还难以完全治愈[1]。目前对神经性疼痛的治疗包括药物疗法、神经调节疗法及手术治疗等[2]。尽管有多种治疗选择,由于其病因的复杂性,目前治疗效果并不十分满意。电针因其不良反应小,在神经病理性疼痛治疗方面得到广泛应用[3],但其作用机制还有待进一步研究。线粒体自噬在保护受损细胞方面起着重要的作用[4]。线粒体自噬的诱导可缓解周围神经损伤引起的神经病理性疼痛[5]。同时有研究表明,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein-1, Keap1)/核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-related factor 2, Nrf2)信号通路的激活可促进线粒体自噬并缓解神经病理性疼痛[6-7],但电针是否通过调控线粒体自噬改善神经病理性疼痛尚不明确。本研究通过检测电针对L5脊神经结扎(spinal nerve ligation, SNL)大鼠疼痛阈值、脊髓背角线粒体形态结构及自噬相关蛋白表达量的影响,研究电针治疗神经性疼痛疾病的部分机制。
1 材料和方法
1.1 实验动物 选取健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体质量200~250 g,购于温州医科大学实验动物中心[SYXK(浙)2020-0014]。大鼠饲养于22~24 ℃、50%~70%相对湿度、昼夜交替规律变化的房间中,自由饮水及饮食。39只大鼠通过抽签随机平均分为3组:假模组、模型组及电针组。
1.2 SNL模型制作 对模型组大鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠使大鼠麻醉,后背部去毛备皮,以L5棘突为中心纵向切开皮肤及肌肉组织约1 cm,暴露右侧L5横突。将L5横突去除后对右侧L5脊神经进行结扎。对造模大鼠进行单笼饲养,正常饮水及饮食。对假模组大鼠进行相同操作但不进行神经结扎。
1.3 干预方法 将大鼠固定于本实验室设计的专用大鼠固定器(专利申请号:201110021482.5 ......
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