张良，杨嘉麒，张特明，黄颖鹏，游涛，倪仲琳

    温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 普外科，浙江 温州 325027

    胃癌是高发病率和高死亡率的恶性肿瘤疾病，严重危害人类健康。靶向治疗可以显著延长患者生存期，是晚期胃癌患者不可缺少的治疗手段。但是，目前胃癌缺少有效的治疗靶点，只有靶向HER2药物成功应用于胃癌的一线治疗[1]。其他如表皮生长因子(epidermal growth factor receptor, EGFR)、 间质表皮转化因子(mesenchymal-epithelial transition factor, MET)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等治疗靶点在胃癌的应用正处于临床试验或大部分没有达到预期结果[2]。寻找更高效的治疗靶点是提高胃癌患者生存的关键[3]。Polo样激酶(polo-like kinase, PLK)家族是一类丝苏氨酸蛋白激酶，被认为与细胞周期调节有关。其中，PLK4结构特殊，被发现与细胞中心粒复制有关，在众多肿瘤中呈现高表达，且与预后有一定相关性[4]。 已经发现PLK4的高表达可以促进结肠癌细胞增殖和迁移等恶性表型[5-6]，另外，PLK4靶向治疗已经被美国食品药品监督管理局批准应用于难治性或复发的急性骨髓性白血病。但是，PLK4在胃癌方面的研究甚少。有研究基于TCGA胃癌数据库中mRNA的差异表达计算干细胞指数，提出PLK4与胃癌的细胞干性相关，高的细胞干性指数预后更好[7-9]。通过免疫组化检测PLK4蛋白质表达同样提示胃癌中PLK4相对高表达，但高表达的预后更差[10]。这些报道仅仅停留在相关性分析上，缺乏PLK4抑制剂对胃癌细胞功能学上的深入研究。PLK4到底可否作为胃癌的治疗靶点及其对胃癌细胞功能的影响和机制尚不明确，因此，本研究旨在探讨PLK4抑制剂Centrinone(LCR-263)在体外对胃癌细胞的生长、迁移及凋亡的影响，评估其作为胃癌靶向治疗药物的潜在价值。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂 PLK4 抑制剂Centrinone购于美国MedChemexpress生物科技公司，半胱天冬酶-3 (Caspase-3)、半胱天冬酶-3 裂解体(Cleaved-Caspase-3)、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADPribose polymerase, PARP)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)等抗体购于美国Proteintech Group生物技术公司 ......